| 白芷ISSR-PCR反应体系的建立和优化 |
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| 引用本文： | 郭丁丁,马逾英,唐琳,陈要臻. 白芷ISSR-PCR反应体系的建立和优化[J]. 成都中医药大学学报, 2008, 31(2) |
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| 作者姓名： | 郭丁丁 马逾英 唐琳 陈要臻 |
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| 作者单位： | 成都中医药大学药学院,四川,成都,610075;四川大学生命科学院,四川,成都,610064 |
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| 摘 要： | 目的:建立白芷的ISSR最佳反应体系及PCR扩增参数,为今后利用ISSR标记技术进行白芷鉴定及种质遗传多样性分析提供一个标准化程序.方法:以白芷基因组DNA为模板,分析了ISSR反应体系中模板DNA、Mg2 、dNTPs、引物浓度,TaqDNA聚合酶用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响.结果:建立了重复性好,分辨率高的ISSR反应体系,即在25μL反应体系中,模板DNA浓度为10～30 ng,2.5μ10×PCR buffer(Mg2 free),MgCl2 2.0 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq酶1.0U,引物0.6 pμmol/L;扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,引物在筛选后的最佳退火温度退火45 s,72℃延伸2min,共计39个循环,循环结束后在72℃延伸5 min.结论:建立了适用于白芷的ISSR反应体系.为今后利用ISSR标记技术开展白芷遗传变异分析和构建遗传图谱奠定了基础.
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| 关 键 词： | 白芷 ISSR反应体系 建立和优化 |
Optimization for the Reaction System of Angelica dahuruica ISSR- PCR |
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| GUO Ding-ding,MA Yu-ying,TANG Lin,et al. Optimization for the Reaction System of Angelica dahuruica ISSR- PCR[J]. Journal of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2008, 31(2) |
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| Authors: | GUO Ding-ding MA Yu-ying TANG Lin et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Angelica dahurica ISSR reaction system establishment and optimization |
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