| 血管生成抑制因子METH-1腺病毒载体的构建 |
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| 引用本文： | 宋革,张阳,葛坚,张燕,江儒章. 血管生成抑制因子METH-1腺病毒载体的构建[J]. 中国临床康复, 2006, 10(45): 97-99,I0007 |
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| 作者姓名： | 宋革 张阳 葛坚 张燕 江儒章 |
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| 作者单位： | [1]中山大学眼科中心,广东省广州市510060 [2]解放军第四五八医院整形科,广东省广州市510602 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30500555）;广东省自然科学基金资助项目（5300664）;中国博士后科学基金资助项目（2005037615） |
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| 摘 要： | 目的：利用大肠杆菌同源重组构建重组腺病毒载体并在293细胞制备高滴度的病毒。方法：实验于2004—08／2005-08在中山大学眼科中心国家重点实验室完成。自真核表达载体pMD18-T—METH1中酶切出METH1基因，亚克隆至带有增强型绿色荧光蛋白表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中，形成转移质粒pAdTrack-CMV-METH1，在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组，得到重组腺病毒载体pAd-METH1。以pAd-METH1为模板，经DNA测序正确后，用PacⅠ酶切线性化pAd-METH1，转染293细胞，包装成重组病毒颗粒，荧光显微镜观察转染细胞增强型绿色荧光蛋白的表达，采用聚合酶链反应方法对重组腺病毒进行鉴定。结果：①构建了携带外源基因人血管生成抑制因子的穿梭载体pAdTrack-CMV-METH1。②制备了METH1重组腺病毒载体pAdEasy—METH1。③METH1重组腺病毒可感染293细胞并在293细胞中进行有效的复制。结论：应用细菌内同源重组能够快速构建腺病毒载体，制备高滴度重组病毒，为METH1基因功能研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 腺病毒科 重组，遗传 绿色荧光蛋白质类 血管生成抑制剂 |
| 文章编号： | 1671-5926（2006）45-0097-03 |
| 收稿时间： | 2006-06-17 |
| 修稿时间： | 2006-07-15 |
Construction of antiangiogenesis METH1 gene recombinant adenovirus vector |
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| Song Ge, Zhang Yang, Ge Jian, Zhang Yan, Jiang Ru-zhang. Construction of antiangiogenesis METH1 gene recombinant adenovirus vector[J]. Chinese Journal of Clinical Rehabilitation, 2006, 10(45): 97-99,I0007 |
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| Authors: | Song Ge Zhang Yang Ge Jian Zhang Yan Jiang Ru-zhang |
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