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细胞间直接接触诱导BMSC软骨分化的初步研究
引用本文:刘霞,周广东,刘伟,曹谊林. 细胞间直接接触诱导BMSC软骨分化的初步研究[J]. 组织工程与重建外科, 2010, 6(2): 70-74. DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2010.02.003
作者姓名:刘霞  周广东  刘伟  曹谊林
作者单位:中国医学科学院整形外科医院;上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),国家高技术研究发展计划(863计划),国家自然科学基金,上海市曙光计划,上海市科技启明星跟踪计划 
摘    要:目的探讨细胞间直接接触是否能够单独诱导骨髓基质干细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSC)软骨分化。方法体外培养扩增猪BMSC与关节软骨细胞,将1.0×106的细胞总量以2000r/min离心8min,制成细胞团块,即Pellet培养。实验分为5组,实验组:经0.5%多聚甲醛固定的软骨细胞与BMSC以1∶1混合;对照组1:同等数量的未经多聚甲醛固定的软骨细胞与BMSC1:1共培养制成Pellet;对照组2:同等数量的单纯软骨细胞制成Pellet;对照组3:同等数量的单纯BMSC制成Pellet;对照组4:同等数量的单纯经多聚甲醛固定的软骨细胞制成Pellet。每3天换液一次,每组3例。培养4周后,以大体观察、组织学、免疫组织化学、RT-PCR等方法对Pellet进行全面评价。结果培养4周后,实验组形成的Pellet,明显缩小,形状略不规则,颜色灰暗,柔软且没有弹性,组织学检测提示主要为纤维性成分及死细胞样结构,Safranin O染色及Ⅱ型胶原免疫组化均为阴性,RT-PCR检测未表达Ⅱ型胶原。对照组1和对照组2均形成圆盘状组织块,表面光滑,触之有一定弹性,组织学检测软骨陷窝形态规则,Safranin O染色及Ⅱ型胶原免疫组化均有阳性表达,RT-PCR检测Ⅱ型胶原高表达。对照组3的组织块明显收缩,呈褐色,无弹性。对照组4,细胞松散,不能形成Pellet。对照组3和4的各种软骨特异性相关检测均为阴性。结论细胞间直接接触不能够单独诱导BMSC向软骨分化,不是软骨细胞与BMSC混合共培养中发挥诱导作用的主要因素。

关 键 词:骨髓基质细胞  软骨细胞  细胞间直接接触  多聚甲醛  软骨形成  

The Study on the Role of the Cell-cell Contact in Inducing Bone Marrow Stromal Cells Chondrogenesis
LIU Xia,ZHOU Guangdong,LIU Wei,CAO Yilin. The Study on the Role of the Cell-cell Contact in Inducing Bone Marrow Stromal Cells Chondrogenesis[J]. Journal of Tissue Engineering and Reconstructive Surgery, 2010, 6(2): 70-74. DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2010.02.003
Authors:LIU Xia  ZHOU Guangdong  LIU Wei  CAO Yilin
Affiliation:1 Plastic Surgery Hospital,Chinese Academy of Medical Science,Beijing 100144,China;2 Department of Plastic and Reconstructive Surgery,Shanghai Ninth People’s Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200011,China.
Abstract:
Keywords:Bone marrow stromal cells  Chondrocytes  Cell-cell contact  Paraformaldehyde  Chondrogenesis
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