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广州管圆线虫V期幼虫cDNA表达文库中优势诊断抗原的筛选、鉴定和克隆
引用本文:陈婧,杨潇,刘茜,詹希美,何蔼.广州管圆线虫V期幼虫cDNA表达文库中优势诊断抗原的筛选、鉴定和克隆[J].热带医学杂志,2013(1):1-4,12,133.
作者姓名:陈婧  杨潇  刘茜  詹希美  何蔼
作者单位:中山大学中山医学院寄生虫教研室;中山大学热带病防治研究教育部重点实验室
基金项目:国家973基金(2010CB530004);国家自然科学基金(2005U0632003)
摘    要:目的筛选与广州管圆线虫感染小鼠血清具有较强免疫反应性的优势诊断抗原。方法用感染广州管圆线虫21d的小鼠感染血清做免疫探针筛选广州管圆线虫v期幼虫cDNA表达文库,对筛选得到的阳性克隆进行插入片段的测序和生物信息学分析,再根据测序结果设计引物扩增该基因并将其克隆入PET-30a(+)载体中。结果共获得6个阳性克隆,经DNA测序及同源性分析表明,发现其中2个与广州管圆线虫髓鞘转录因子1(MYT1)高度同源,1个与广州管圆线虫胶原蛋白家族基因(alpha-collagen)高度同源,且均为全长cDNA。克隆出广州管圆线虫MYT1全长cDNA序列.构建的新基因重组质粒经双酶切后证明含有与目的片段长度相符合的目的片段。结论用感染小鼠血清作为探针初步筛选到2个广州管圆线虫基因,并成功构建MYT1的原核表达重组质粒PET30a(+)-MYT1。

关 键 词:广州管圆线虫  V期幼虫  cDNA文库  髓鞘转录因子1

Immunoscreening,cloning and primary identification of the potential diagnosis antigen genes from the cDNA library of Angiostrongylus cantonensis,stage-V larvae
CHEN Jing,YANG Xiao,LIU Qian,ZHAN Xi-mei,HE Ai.Immunoscreening,cloning and primary identification of the potential diagnosis antigen genes from the cDNA library of Angiostrongylus cantonensis,stage-V larvae[J].Journal Of Tropical Medicine,2013(1):1-4,12,133.
Authors:CHEN Jing  YANG Xiao  LIU Qian  ZHAN Xi-mei  HE Ai
Institution:1,2 (1.Department of Parasitology,Zhongshan Medical College,Sun Yat-sen University,Guangdong,Guangzhou 510080;2.Key Laboratory of Tropical Disease Control,Ministry of Education,Sun Yat-sen University,Guangdong,Guangzhou 510080,China)
Abstract:
Keywords:
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