| RNA干扰CREB对缓激肽作用的胶质瘤细胞IL-1β分泌的影响 |
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| 作者姓名： | 王振华 王萍 付伟 薛一雪 |
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| 作者单位： | 中国医科大学基础医学院生理学教研室,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学基础医学院神经生物学教研室,辽宁,沈阳,110001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30670723,30600060,30400145,30570650)，辽宁省自然科学基金(20052102)，高等学校博士学科点专项科研基金(20050159005) |
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| 摘 要： | 目的探讨转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)的磷酸化是否介导了缓激肽刺激大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。方法利用RNA干扰(RNAi)技术,以CREB为靶基因,将体外化学合成的CREB序列特异性双链小干扰RNA(siRNA)和无关序列的siRNA分别与Lipofectamine2000结合后转染细胞,用Western blot分析CREB蛋白的表达水平。利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测CREB siRNA转染前后,缓激肽诱导C6胶质瘤细胞IL-1βmRNA及细胞培养上清液中IL-1β的表达水平。结果CREB序列特异性siRNA转染细胞72h后,可较强的抑制CREB蛋白的表达,而无关序列的siRNA对CREB蛋白表达水平无明显的抑制作用。RT-PCR和放射免疫法结果均显示CREBsiRNA干预C6细胞后,并未改变缓激肽刺激IL-1β表达的能力。结论化学合成的siRNA可有效抑制C6胶质瘤细胞中CREB的表达,CREB可能未参与缓激肽刺激C6细胞IL-1β表达的信号转导过程。
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| 关 键 词： | RNA干扰 神经胶质瘤 CREB 缓激肽 白细胞介素-1β |
| 文章编号： | 1006-2947（2007）03-0235-04 |
| 修稿时间： | 2007-03-28 |
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