| 人胰激肽释放酶基因的克隆及融合蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 戴勇,彭武建,李体远,杜珙,孙文学,黄瑞芳.人胰激肽释放酶基因的克隆及融合蛋白的表达[J].中国现代医学杂志,2005,15(16):2405-2409. |
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| 作者姓名： | 戴勇 彭武建 李体远 杜珙 孙文学 黄瑞芳 |
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| 作者单位： | 1. 暨南大学医学院第二附属医院(深圳市人民医院),广东,深圳,518020
2. 温州医学院第一附属医院,浙江,温州,325000 |
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| 基金项目： | This work was supported by the Nature Science Foundation of Shenzhen city Science and Technology Bureau (No .200204005). |
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| 摘 要： | 目的开发激肽释放酶基因工程产品，为开展基因治疗高血压奠定基础。方法提取人胰腺组织总RNA，逆转录后PCR扩增激肽释放酶cDNA。回收、补平后插入质粒KS，构建出中间载体KSKK，酶切鉴定后双向测序分析激肽释放酶基因序列。从KSKK中切出激肽释放酶原及激肽释放酶基因，插入真核表达载体PET-28b（＋），经酶切鉴定后，进行核苷酸序列分析和融合蛋白表达。结果本实验克隆的激肽释放酶基因与GenBank报告的激肽释放酶基因相比，有一个碱基不同，同源性为99．8％。将IPTG诱导表达进行SDS—PAGE电泳，与蛋白标准品比较在31800处可见明显的高表达带。免疫印迹实验表明重组蛋白具有KK的抗原性。结论已成功克隆并表达了人组织激肽释放酶基因，为进一步开发基因工程产品及进行基因治疗高血压研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 激肽释放酶 基因克隆 表达 |
| 文章编号： | 1005-8982（2005）16-2405-05 |
| 收稿时间： | 2004-07-13 |
| 修稿时间： | 2004-07-13 |
Cloning of human pancreatic kallikrein gene and expression of fusion protein |
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| DAI Yong,PENG Wu-jian,LI Ti-yuan,DU Hong,SUN Wen-xue,HUANG Rui-fang.Cloning of human pancreatic kallikrein gene and expression of fusion protein[J].China Journal of Modern Medicine,2005,15(16):2405-2409. |
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| Authors: | DAI Yong PENG Wu-jian LI Ti-yuan DU Hong SUN Wen-xue HUANG Rui-fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Kallikrein Gene cloning Expression |
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