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人ODC基因第三外显子反义RNA腺病毒载体的构建
引用本文:张岩,刘贤锡,胡海燕,耿昭,王晓明,张冰. 人ODC基因第三外显子反义RNA腺病毒载体的构建[J]. 山东大学学报(医学版), 2003, 41(4): 371-374
作者姓名:张岩  刘贤锡  胡海燕  耿昭  王晓明  张冰
作者单位:山东大学医学院分子生物学实验中心
基金项目:山东省科技厅科研基金,山东省卫生厅科研基金资助(2001CA1CAA3)
摘    要:目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因第三外显子反义RNA的腺病毒载体。方法:RT-PCR方法克隆出人ODC基因第三外显子的片段,插入pMDl8-T载体中,经SalⅠ、BglⅡ酶切,插入穿梭质粒pAd-Track-CMV形成重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr。经Pme Ⅰ酶切线性化后,转入pAdesy-1细菌中与含腺病毒基因骨架的质粒pAdesy-1同源重组。将重组质粒pAdesy-ODCr经Pac I酶切后,转染293细胞包装成腺病毒颗粒,经荧光显微镜和PCR方法对重组腺病毒进行鉴定。结果:用RT-PCR方法从人前列腺癌组织中扩增出120bp的cDNA片段,经测序证实为ODC基因第三外显子的片段。重组质粒pAdTrack-CMV-ODC。转入pAdesy-l细菌中获得多个阳性克隆。重组质粒pAdesy-ODC。转染293细胞进行包装,经荧光显微镜观察可见其在293细胞中表达。进一步通过PCR法证实其含有目的基因。结论:成功地构建了ODC基因第三外显子反义RNA重组腺病毒载体,为研究其抗肿瘤的作用奠定了基础。

关 键 词:鸟氨酸脱羧酶 腺病毒载体 反义RNA 外显子
文章编号:1671-7554(2003)04-0371-04
修稿时间:2003-01-12

Construction of an antisense RNA recombinant adenovirus vector of the third extron in ODC gene
ZHANG Yan,LIU Xian-xi,HU Hai-yan,et al. Construction of an antisense RNA recombinant adenovirus vector of the third extron in ODC gene[J]. Journal of Shandong University:Health Sciences, 2003, 41(4): 371-374
Authors:ZHANG Yan  LIU Xian-xi  HU Hai-yan  et al
Abstract:
Keywords:Ornithine decarboxylase  Adenovirus vector  RNA  antisense  
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