| 结核分枝杆菌重组质粒pGEX-ESAT-6构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达效率的研究 |
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| 引用本文： | 谢婷,李文桂.结核分枝杆菌重组质粒pGEX-ESAT-6构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达效率的研究[J].中国病原生物学杂志,2008,3(3):173-176. |
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| 作者姓名： | 谢婷 李文桂 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的构建结核分枝杆菌（MTB）重组质粒pGEX-ESAT-6，分析ESAT-6抗原在大肠埃希菌BL21（DE3）中的表达效率。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板，通过PCR扩增得到ESAT-6抗原编码基因；将该基因定向克隆于含有谷胱甘肽-S-转移酶（GST）基因的高效原核表达载体pGEX-1λT，经酶切鉴定后以IPTG诱导表达ESAT-6／GST融合蛋白；SDS—PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果PCR扩增出288bp的ESAT-6基因；双酶切证实ESAT6基因成功插入pGEX-1λT中，构建了pGEX—ESAT-6穿梭表达载体。SDS—PAGE分析重组质粒pGEX-ESAT-6表达产物的分子质量单位为35ku，表达效率为20％，Western blot检测该蛋白能被活动性结核病人血清特异识别。结论结核分枝杆菌重组质粒pGEX-ESAT-6在大肠埃希菌中获得了高效融合表达，表达的ESAT-6重组蛋白具有抗原特异性。
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| 关 键 词： | 分枝杆菌 结核 重组质粒pGEX-ESAT-6 大肠埃希菌 表达效率 结核分枝杆菌 重组质粒 大肠埃希菌 表达效率 研究 Mycobacterium tuberculosis recombinant plasmid efficiency expression 抗原特异性 重组蛋白 融合表达 特异识别 人血清 结核病 活动性 检测 量单位 分子 穿梭表达载体 |
| 文章编号： | 1673-5234(2008)03-0173-03 |
| 修稿时间： | 2007年7月19日 |
Construction and expression efficiency of recombinant plasmid pGEX-ESAT-6 of Mycobacterium tuberculosis |
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| XIE Ting,LI Wen-gui.Construction and expression efficiency of recombinant plasmid pGEX-ESAT-6 of Mycobacterium tuberculosis[J].Journal of Pathogen Biology,2008,3(3):173-176. |
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| Authors: | XIE Ting LI Wen-gui |
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