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牛催乳素基因组全序列的克隆及在真核细胞中的表达
引用本文:曹新,曾溢滔.牛催乳素基因组全序列的克隆及在真核细胞中的表达[J].南京医科大学学报,2003,23(2):112-115.
作者姓名:曹新  曾溢滔
作者单位:上海市儿童医院上海医学遗传研究所,上海市儿童医院上海医学遗传研究所 上海 200040,上海 200040 南京医科大学细胞生物学与医学遗传学系工作,江苏 南京 210029
摘    要:目的:构建牛催乳家(bPRL)为目的基因转基因动物—乳腺生物反应器。方法:采用长距离PCR技术,首次从正常牛外周血细胞中克隆到全长9388bp的bPRL基因组序列,利用亚克隆的方法将bPRL基因组DNA克隆到真核表达载体pcD—NA3.1( )上,构建出pcDNA3.1( )/bPRL的重组表达载体,通过脂质体转染至非洲绿毛猴肾细胞株(COS—7),逆转录—PCR得到长度为804bP扩增片段。结果:序列测定bPRL基因包括全部5个外显子和4个内含子,5’端854bp的上游调控区以及3’端69bP的非翻译区(UTR)。bPRL cDNA包含信号肽在内的全长序列。结论:克隆的bPRL基因组DNA序列在转录水平上具有生物学功能,在体外培养的真核细胞中能够进行正常表达,为进一步建立转基因动物—乳腺生物反应器奠定了坚实的基础。

关 键 词:长距离PCR  COS—7细胞  催乳素  真核细胞  克隆
文章编号:1007-4368(2003)02-0112-04
修稿时间:2002年7月11日

Cloning of Bovine Prolactin Genomic DNA and Its Expression in the Eukaryotic Cell
CAO Xin,ZENG Yi-tao.Cloning of Bovine Prolactin Genomic DNA and Its Expression in the Eukaryotic Cell[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2003,23(2):112-115.
Authors:CAO Xin  ZENG Yi-tao
Abstract:
Keywords:prolactin  long PCR  COS-7 cell  bovine
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