五味子酮对APP转基因鼠神经干细胞分化中Tau蛋白过磷酸化水平的影响 |
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引用本文: | 李国栋,鄢文海,邢 莹.五味子酮对APP转基因鼠神经干细胞分化中Tau蛋白过磷酸化水平的影响[J].中国神经再生研究,2009,13(23):4490-4494. |
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作者姓名: | 李国栋 鄢文海 邢 莹 |
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作者单位: | 郑州大学医学实验中心,郑州大学医学院干细胞中心,河南省郑州市 450052,郑州大学医学院干细胞中心,河南省郑州市 450052 |
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摘 要: | 背景:华中五味子酮有强的抗氧化活性,可高效清除羟自由基和超氧阴离子,对处于活性氧应激状态下的细胞具有保护作用。神经元内神经原纤维缠结主要是由异常磷酸化的Tau蛋白组成,与阿尔茨海默病的严重程度呈正相关。
目的:探讨五味子酮在APP转基因小鼠神经干细胞诱导分化成神经细胞的过程中对Tau蛋白磷酸化的作用。
设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-07/2008-10在郑州大学医学实验中心完成。
材料:自中国协和医科大学遗传动物中心购得APP基因突变小鼠30只,五味子酮由河南省中医研究院药物所提供。
方法:剪取新生APP转基因小鼠尾尖,常规提取DNA,采用PCR法检测动物是否携带有APP基因,APP转基因阳性鼠记为“APP+”,APP转基因阴性鼠记为“APP-”。分别取APP+鼠和APP-鼠海马部位脑组织,体外分离培养神经干细胞,并将纯化的神经干细胞向神经细胞方向诱导分化。将从APP+鼠来源的细胞分为五味子酮组、APP+细胞对照组,将APP-鼠来源的细胞设为APP-细胞对照组。五味子酮组向细胞培养液中加入终浓度为50 μmol/L的五味子酮溶液,余2组加入相同容积的PBS,培养24 h。
主要观察指标:免疫荧光化学和免疫印迹分析测定APP+、APP-细胞Tau蛋白在262、396位点的磷酸化水平。
结果:与APP+细胞对照组比较,五味子酮组细胞荧光强度减轻,TauPs262]、TauPs396]的磷酸化水平均降低,且TauPs396]位点的磷酸化水平降低尤为明显。APP-细胞对照组TauPs262]、TauPs396]磷酸化水平均较低。
结论:在APP转基因小鼠神经干细胞诱导分化过程中,五味子酮可以明显降低Tau蛋白在396、262位点的磷酸化水平,减轻神经元损伤,但其磷酸化程度并未达到阴性细胞水平。
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关 键 词: | 五味子酮 Tau蛋白 过磷酸化 APP转基因 小鼠 |
Effects of schisandrone on Tau protein hyperphosphorylation in differentiation of neural stem cells from APP transgenic mice |
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Institution: | Experimental Center for Medicine, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China,Stem Cell Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China,Stem Cell Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China |
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