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内皮抑素重组腺病毒载体的构建及制备
引用本文:张子祥,李德春,赵华,朱兴国. 内皮抑素重组腺病毒载体的构建及制备[J]. 苏州大学学报(自然科学版), 2004, 24(5): 654-657
作者姓名:张子祥  李德春  赵华  朱兴国
作者单位:苏州大学附属第一医院普外科 江苏苏州215006(张子祥,李德春,赵华),苏州大学附属第一医院普外科 江苏苏州215006(朱兴国)
基金项目:卫生部科学研究基金资助课题(WKJ2004-2-001)
摘    要:目的 构建鼠源性内皮抑素(mEndostatin)重组腺病毒真核表达载体,为下一步研究其在体外表达及动物实验研究提供基础。方法 以mEndostatin质粒为模板通过PCR方法扩增回收mEndostatin,并在其5'端引入M-成瘤蛋白信号肽。将mEndostatin连接到腺病毒载体pCA13中,构建pCA13-mEndo表达质粒。将此表达质粒与腺病毒重组质粒pBGHE3通过Lipofectamine 2000共同转染293细胞,经同源重组产生重组腺病毒Ad-mEndo。纯化后重组腺病毒Ad-mEndo在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化、测定其滴度。结果 扩增得到的mEndostatin经酶切鉴定、PCR扩增、DNA测序证实为鼠源性内皮抑素,重组腺病毒Ad-mEndo的滴度为6.3×1010 pfu/ml。结论 该实验为今后研究重组腺病毒mEndostatin用于恶性肿瘤的基因治疗打下了基础。

关 键 词:内皮抑素  腺病毒  真核表达
文章编号:1000-5749(2004)05-0654-03
修稿时间:2004-02-12

Construction of Recombinant Adenovirus Vector Expressing the Mouse Endostatin
ZHANG Zi-xiang,LI De-chun,ZHAO Hua,et al. Construction of Recombinant Adenovirus Vector Expressing the Mouse Endostatin[J]. Suzhou University Journal of Medical Science, 2004, 24(5): 654-657
Authors:ZHANG Zi-xiang  LI De-chun  ZHAO Hua  et al
Abstract:
Keywords:endostatin  adenovirus  eukaryotic
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