| 瑞典突变型人淀粉样前体蛋白(APPSWE)基因的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 何思敏,高伟平,李朝晖,梁海明.瑞典突变型人淀粉样前体蛋白(APPSWE)基因的构建与鉴定[J].北方药学,2017,14(9). |
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| 作者姓名： | 何思敏 高伟平 李朝晖 梁海明 |
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| 作者单位： | 1. 广东医科大学附属医院药学部 湛江 524023;2. 广东省惠东县人民医院药剂科 惠州 524023 |
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| 摘 要： | 目的:构建携带瑞典突变型淀粉样前体蛋白基因(APPswe)的表达载体pIRES2-EGFP-APPswe.方法:提取脑血管组织总RNA,反转录为cDNA;以cDNA为模板,NCBI上查找APP695的序列,设计引物,应用PCR和Overlap PCR技术扩张野生型APP695,点突变技术诱导构建突变型APPswe测序证实,并进行质粒转染细胞验证.结果:经过PCR、电泳、DNA测序分析,Western Blot等方法,证实成功构建瑞典突变型APPswe,转染后的细胞可见荧光蛋白,并表达APP蛋白.结论:以脑血管组织为材料,应用RT-PCR和点突变技术可以成功构建瑞典突变型APPswe,这为后续研究阿尔茨海默氏病(AD)发病的分子机制和治疗药物的筛选奠定基础.
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| 关 键 词： | 瑞典突变 淀粉样前体蛋白(APP) 构建 鉴定 |
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