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小檗胺对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制研究
引用本文:程汝滨,杨 波,钟晓明,黄 真.小檗胺对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制研究[J].中草药,2013,44(14):1967-1973.
作者姓名:程汝滨  杨 波  钟晓明  黄 真
作者单位:浙江中医药大学药学院,浙江杭州,310053
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81202820);浙江省自然科学基金资助项目(LQ12H28005);浙江省中医药管理局项目(2012ZQ006);浙江省教育厅科研项目(Y201223804);浙江省2012年第一批省级重点科技创新团队项目(2010R50044-12);浙江中医药大学人才专项项目(2012ZR05)
摘    要:目的 研究小檗胺体外对人肺腺癌A549细胞凋亡及TNF-α-JNK信号通路的影响.方法 MTT比色法检测小檗胺对A549细胞增殖的影响;显微镜观察A549细胞形态变化;Annexin V/PI双标法检测细胞的凋亡率;Western blotting法检测细胞凋亡标记蛋白Bcl-x、Caspase-3和PARP表达的变化,c-jun氨基末端激酶(JNK)的蛋白表达及其磷酸化表达水平;荧光定量PCR和ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的变化;通过JNK通路抑制剂进一步验证TNF-α-JNK信号通路在小檗胺药效中的作用.结果小檗胺能够显著抑制A549细胞增殖,并呈浓度相关性,小檗胺给药后24 h的IC50值为9.01 μmol/L;经小檗胺处理后,A549细胞可见典型的凋亡形态学改变,Annexin V/PI双标法检测结果也显示小檗胺可诱导A549细胞凋亡,小檗胺10 μmol/L组细胞早期凋亡率为13.8%,为对照组的6.6倍;小檗胺可显著降低抗凋亡蛋白Bcl-x的表达,明显增强促凋亡蛋白Caspase-3和PARP的活性,显著提高TNF-α基因和蛋白表达及JNK蛋白的磷酸化表达水平,激活TNF-α-JNK通路.结论小檗胺能抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与TNF-α-JNK信号通路的激活有关.

关 键 词:小檗胺  人肺腺癌A549细胞  细胞增殖  细胞凋亡  TNF-α-JNK通路

Effect of berbamine on apoptosis in human pulmonary carcinoma cell A549 and its mechanism
CHENG Ru-bin,YANG Bo,ZHONG Xiao-ming,HUANG Zhen.Effect of berbamine on apoptosis in human pulmonary carcinoma cell A549 and its mechanism[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2013,44(14):1967-1973.
Authors:CHENG Ru-bin  YANG Bo  ZHONG Xiao-ming  HUANG Zhen
Institution:College of Pharmaceutical Science, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China
Abstract:
Keywords:berbamine  human pulmonary carcinoma cell A549  cell proliferation  apoptosis  TNF-α-JNK pathway
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