| 用双拷贝逆转录病毒载体转导人G－CSF cDNA的实验研究 |
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| 引用本文： | 郭葆玉,胡宗林,徐慧敏,孔宪涛,陆德如.用双拷贝逆转录病毒载体转导人G－CSF cDNA的实验研究[J].第二军医大学学报,1995(1). |
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| 作者姓名： | 郭葆玉 胡宗林 徐慧敏 孔宪涛 陆德如 |
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| 作者单位： | 第二军医大学医学技术分子遗传研究所，第二军医大学长征医院检验科 |
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| 摘 要： | 为克服逆转录病毒中内部启动子对插入外源基因表达的干扰，将人Ｇ－ＣＳＦ（粒细胞集落刺激因子）ｃＤＮＡ插入双拷贝载体Ｎ２Ａ的３＇ＬＴＲＵ３区上的多克隆位点，酶切鉴定后将重组质粒用电击转导法转入Ｐｓｉ－２嗜单性包装细胞系，经Ｇ－４１８选择压力，两周后挑出阳性克隆，测定感染滴度后转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，选择挑出抗性克隆，测定Ｇ－ＣＳＦ表达量，最高达５３．３Ｕ／１０６细胞。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析证明嵌合的目的基因在感染细胞中通过基因复制而转染到５＇ＬＴＲ的转录单位之外并且在染色体ＤＮＡ中稳定整合，复制产生两个拷贝，在３＇ＬＴＲ和５＇ＬＴＲ中各有一个基因。
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| 关 键 词： | 逆转录病毒科 粒细胞集落刺激因子 基因 病毒 |
A study on improvement of expression of human G-CSF cDNA transferred with retroviral double copy vector |
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| Guo Baoyu, Hu Zonglin, Xu Huimin, Kong Xiantao, Lu Deru.A study on improvement of expression of human G-CSF cDNA transferred with retroviral double copy vector[J].Academic Journal of Second Military Medical University,1995(1). |
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| Authors: | Guo Baoyu Hu Zonglin Xu Huimin Kong Xiantao Lu Deru |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | retroviridae granulocyte colony-stimulating factor genes viral |
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