| 病毒包装细胞PA317/HGSTπ的建立 |
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| 引用本文： | 罗晓英,唐良萏,周智,陈亚西,黄爱龙,贾英.病毒包装细胞PA317/HGSTπ的建立[J].重庆医学,2004,33(8):1187-1189. |
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| 作者姓名： | 罗晓英 唐良萏 周智 陈亚西 黄爱龙 贾英 |
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| 作者单位： | 重庆钢铁公司总医院;重庆医科大学附属第一医院妇产科,400016;重庆医科大学肝炎研究所,400010 |
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| 摘 要： | 目的建立产逆转录病毒的PA317/HGSTπ细胞株,为进一步把耐药基因GSTπ导入造血干细胞以逆转卵巢癌化疗药物对骨髓的毒副作用的研究奠定基础.方法用限制性内切酶HpaⅠ、BamhⅠ分别双酶切质粒pLXSH-GSTπ和pLXSN,回收GSTπ小片段和pLXSN大片段,在T4连接酶的作用下,构建重组逆转录病毒质粒pLXSN-GSTπ;酶切鉴定后用脂质体转染PA317包装细胞,G418筛选获得抗性克隆,用Hela细胞测定病毒滴度.结果 (1)酶切证实pLXSN-GSTπ和pLXSH-GSTπ的目的片段完全一致,表明重组质粒构建成功;(2)G418筛选获得多个抗性克隆,Hela测定病毒滴度最高为2.2×103CFU/ml.结论本研究成功建立了产病毒包装细胞株PA317/HGSTπ,该细胞株能产生含有耐药基因GSTπ的逆转录病毒,为进一步将HGSTπ应用于卵巢癌的大剂量化疗中奠定了良好的基础.
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| 关 键 词： | GSTπ 逆转录病毒 包装细胞 转染 卵巢癌 |
| 文章编号： | 1671-8348(2004)08-1187-03 |
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