| 小鼠IL-10重组慢病毒载体的构建和病毒包装 |
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| 引用本文： | 陈亮,温桂兰,许飞. 小鼠IL-10重组慢病毒载体的构建和病毒包装[J]. 中国免疫学杂志, 2011, 27(6): 540-544. DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.06.014 |
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| 作者姓名： | 陈亮 温桂兰 许飞 |
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| 作者单位： | 南昌大学第一附属医院呼吸内科,南昌,330006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目资助 |
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| 摘 要： | 目的:构建小鼠IL-10重组慢病毒表达载体并进行包装,为进一步研究IL-10基因修饰树突细胞在哮喘免疫耐受中的作用提供实验基础。方法:小鼠IL-10基因片段经PCR扩增后,与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,获得PGC-LV-IL-10重组慢病毒并转化细菌感受态细胞。克隆菌落行PCR鉴定,对阳性的重组质粒进行测序并转入293T细胞,荧光显微镜下观察GFP表达并行Western blot鉴定。将重组质粒与慢病毒包装系统一同转染293T细胞进行病毒包装,Real-time定量PCR法检测病毒滴度。结果:DNA测序结果及Western blot鉴定证实成功构建小鼠IL-10重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为2×108TU/ml。结论:成功构建并包装小鼠IL-10重组慢病毒表达载体。
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| 关 键 词： | IL-10基因 慢病毒载体 免疫耐受 |
Construction of mouse IL-10 recombinanted lentiviral vector and virus packaging |
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| CHEN Liang,WEN Gui-Lan,XU Fei. Construction of mouse IL-10 recombinanted lentiviral vector and virus packaging[J]. Chinese Journal of Immunology, 2011, 27(6): 540-544. DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.06.014 |
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| Authors: | CHEN Liang WEN Gui-Lan XU Fei |
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| Affiliation: | .Department of Respiratory Medicine,The First Affiliated Hospital,Nanchang University,Nanchang 330006,China |
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| Abstract: | |
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