| 酵母PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株构建 |
| |
| 作者姓名： | 崔晓静 杨晓迪 袁 頔 王俊芳 崔红晶 |
| |
| 作者单位： | 1. 广东医科大学医学分子诊断重点实验室衰老研究所;2. 广东医科大学医学技术学院;3. 广东医科大学第二临床医学;4. 广东医科大学基础医学院 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金（31701050,81971329）；;广东省自然科学基金（2022A1515010816）；;广东省医学科研基金（A2022368）；;国家级大学生创新创业训练计划项目（20201057009）； |
| |
| 摘 要： | 目的 构建碱性磷酸酶PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株。方法 依据基因同源重组原理，采用一步基因置换法构建编码Pho8蛋白N端60个氨基酸残基（包括跨膜结构域）缺失的PHO8基因缺失酵母（pho8?60）菌株；线性化载体p RS303-pho13-ko转化pho8?60菌株，进一步缺失PHO13基因，构建pho8?60和PHO13双基因缺失（pho8?60pho13?）菌株；通过缺陷型培养基筛选方法，PCR鉴定阳性克隆基因组DNA。结果 pho8?60菌株电泳条带为1 151 bp和180 bp,pho8?60pho13?菌株电泳条带分别为1 872 bp和174 bp。结论 成功构建pho8?60pho13?酵母菌株。
|
| 关 键 词： | 酿酒酵母 碱性磷酸酶 自噬 衰老 |
|
| 点击此处可从《》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《》下载免费的PDF全文 |
|
