RNAi沉默 N-cadherin 表达对 EC9706细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的: 探讨RNAi沉默 N-cadherin 表达对人食管鳞状细胞癌EC9706细胞体内生物学行为的影响。方法: 通过逆转录病毒介导的RNAi技术将 N-cadherin 基因的RNA干扰载体pMSCVneo/N-cadherin质粒及对照质粒pEGFP-MSCVneo质粒分别转染至人食管癌细胞系EC9706,运用G418进行抗性克隆的筛选和扩增,进而得到稳定转染的人食管癌细胞系EC9706(分别命名为干扰载体组和空载体组),将正常对照组、空载体组和干扰载体组EC9706细胞通过皮下注射的方式接种于裸鼠背部肩胛区,比较各组裸鼠成瘤期、成瘤大小、瘤体终重量及终体积等情况。运用免疫组织化学方法和Western blotting方法检测3组裸鼠移植瘤组织中E-cadherin、N-cadherin和MMP-9蛋白的表达情况。TUNEL法检测3组裸鼠移植瘤组织中细胞的凋亡水平。结果: (1)与正常对照组和空载体组相比较,干扰载体组裸鼠移植瘤的生长速率、成瘤大小、瘤体终重量和终体积明显降低(P<0.05)。(2)与正常对照组和空载体组相比,干扰载体组裸鼠移植瘤组织中N-cadherin和MMP-9的蛋白表达均下调(P<0.05),而E-cadherin的蛋白表达则无明显变化(P>0.05)。(3)与正常对照组(51.55±4.68)和空载体组(54.17±5.26)相比,干扰载体组(106.81±6.47)裸鼠移植瘤组织中凋亡的阳性细胞数明显增加(P<0.05)。结论: RNAi沉默 N-cadherin 表达可明显抑制EC9706细胞裸鼠体内移植瘤的生长,其作用机制可能是通过下调MMP-9的表达,降低细胞对细胞外基质的降解能力,进而降低EC9706细胞的体内侵袭力。RNAi沉默 N-cadherin 表达具有体内抑制食管鳞状细胞癌细胞生长的作用。N-cadherin可望成为抗食管鳞状细胞癌治疗的潜在分子靶点。

Effect of N-cadherin knock-down on tumor formation of EC9706 cells in nude mice

AIM: To explore the effect of N-cadherin knock-down on the biological behavior of EC9706 cells in vivo.METHODS: The control vector pEGFP-MSCVneo and recombinant retroviral vector pMSCVneo/N-cadherin plasmids were transfected into esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) cell line EC9706 according to the manufacturer's instructions.Stable EC9706 cell clones were selected using selection medium containing G418.Untreated EC9706 cells,control vector-transfected EC9706 cells and N-cadherin RNAi-transfected EC970...