| rhLEDGF P52基因原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化 |
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| 引用本文： | 赵海生,王一. rhLEDGF P52基因原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化[J]. 眼科新进展, 2007, 27(1): 25-29 |
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| 作者姓名： | 赵海生 王一 |
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| 作者单位： | 400038,重庆市,中国人民解放军第三军医大学附属西南医院眼科 |
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| 摘 要： | 目的构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,获得rhLEDGFp52蛋白。方法利用基因重组技术将rhLEDGFp52基因构建于原核表达载体pET30a(+)中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,经免疫蛋白印迹试验对rhLEDGFp52进行鉴定并用Ni-NTAHis.Bind.Resin方法进行纯化。结果成功构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得可溶性形式表达,rhLEDGFp52蛋白表达量占菌体蛋白总量的34.63%.WesternBlot结果显示rhLEDGF2蛋白能够特异性与LEDGF-ab结合。Ni-NTAHis.Bind.Resin方法进行纯化后的rhLEDGFp52,最终质量浓度达520mg·L-1,分析其纯度达87.93%.结论成功获得rhLEDGFp52蛋白,这为深入研究其生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 晶状体上皮 p52基因 表达 蛋白纯化 |
| 文章编号： | 1003-5141(2007)01-0025-05 |
| 修稿时间： | 2006-07-26 |
Construction, inducing expression and protein purification of prokaryotic expression vector of rhLEDGF p52 gene |
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| ZHAO Hai-Sheng,WANG Yi. Construction, inducing expression and protein purification of prokaryotic expression vector of rhLEDGF p52 gene[J]. Recent Advances in Ophthalmology, 2007, 27(1): 25-29 |
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| Authors: | ZHAO Hai-Sheng WANG Yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lens epithelium p52 gene expression protein purification |
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