| 应用PCR-反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐链霉素基因型 |
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| 引用本文： | 梁建琴,吴雪琼,曹立雪,张俊仙,李洪敏. 应用PCR-反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐链霉素基因型[J]. 中国医师杂志, 2004, 6(9): 1170-1172 |
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| 作者姓名： | 梁建琴 吴雪琼 曹立雪 张俊仙 李洪敏 |
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| 作者单位： | 解放军第三零九医院结核病研究中心,北京,100091 |
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| 基金项目： | 军队医学杰出中青年人才科研基金项目 (0 1JO2 0 ) |
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| 摘 要： | 目的 应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素(SM)的耐药性。方法 设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐SM基因rpsL和ms的寡核苷酸探针，点于硝酸纤维素膜上，与结核分枝杆菌分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交，并与PCR-单链构象多态性(PCR—SSCP)和PCR-直接测序(PCR-DS)结果比较。结果 53株结核分枝杆菌临床分离株中，三种检测方法符合率为100％。9株敏感株rpsL和ms基因的SSCP图谱、膜杂交结果与标准株完全相同；44株耐SM菌株中，33株存在rpsL基因43位密码子AAG→AGG突变，6株有ms基因513位A→C突变，1株有ms基因513住A→T突变，突变检出率为90．9％，40株耐SM菌株和9株敏感株可用膜杂交方法检测出来，与传统药敏试验方法检测符合率为49／53。结论 应用膜反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌耐SM基因型灵敏度高、特异性好、简便、快速，可用于临床耐药性检测。
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| 关 键 词： | PCR-反向斑点杂交 快速检测 结核分枝杆菌 链霉素 基因型 耐药性 基因变异 |
| 修稿时间： | 2004-02-26 |
Rapid Detection of Mycobacterium Tuberculosis Streptomycin-resistant Genes by PCR-reverse Dot Blot Hybridization |
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| LIANG Jian-qin,WU Xue-qiong,CAO Li-xue,et al.. Rapid Detection of Mycobacterium Tuberculosis Streptomycin-resistant Genes by PCR-reverse Dot Blot Hybridization[J]. Journal of Chinese Physician, 2004, 6(9): 1170-1172 |
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| Authors: | LIANG Jian-qin WU Xue-qiong CAO Li-xue et al. |
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| Affiliation: | LIANG Jian-qin,WU Xue-qiong,CAO Li-xue,et al. Tuberculosis Center,The 309th Hospital of PLA,Beijing 100091,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis Streptomycin Drug resistance Gene variation Reverse dot blot hybridization |
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