硒对幽门螺杆菌空泡毒素及其重组影响 |
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引用本文: | 段秀杰,王文凯,邵世和,刘继斌.硒对幽门螺杆菌空泡毒素及其重组影响[J].中国公共卫生,2008,24(7):833-835. |
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作者姓名: | 段秀杰 王文凯 邵世和 刘继斌 |
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作者单位: | 1. 江苏大学附属医院检验科,镇江,212011 2. 镇江市第一人民医院检验科 3. 江苏大学医学技术学院微生物教研室 4. 南通市肿瘤医院检验科 |
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基金项目: | 江苏大学校科研和校改项目 |
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摘 要: | 目的 研究硒(Se)对幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素(VacA)及重组VacA的影响.方法 采用盐析、透析、柱层析、浓缩、抽滤等方法提纯幽门螺杆菌分泌的空泡毒素.通过琼脂糖凝胶电泳、基因序列分析鉴定重组载体,重组VacA产物经Ni-TEDTM>蛋白纯化系统纯化,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、及免疫印迹(Western blot)鉴定,间接酶联免疫吸附(ELISA)法检测其抗原特异性.进行细胞培养、细胞爬片;采用分光光度计、倒置显微镜、透射电镜及流式细胞仪等方法检测硒对幽门螺杆菌分泌的VacA及重组毒素蛋白功能的影响.结果 12 mmol/L硒即可使幽门螺杆菌形态发生球形变.鞭毛及菌毛出现脱落,溶血作用减弱,硒对VacA空泡毒作用无直接影响(P>0.05);硒通过抑制Hp生长减少VacA产生量从而使空泡毒作用减弱;通过抑制表达VacA的大肠埃希菌生长,减少重组VacA表达量;能增强重组VacA对人胃上皮癌细胞株(SGC-7901)生长抑制作用,使细胞分裂指数、集落形成率、S期细胞数量降低,G1期细胞总数增加;使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素,并随硒浓度增加颜色加深.结论 硒能抑制Hp生长,改变Hp的形态及结构;可使重组vacA表达量减少;能增强重组VacA对SGC-7901细胞的生长抑制及诱导细胞凋亡作用;可使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素;不能直接抑制VacA的空泡毒作用.
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关 键 词: | 幽门螺杆菌(Hp) 空泡毒素(VacA) 重组空泡毒素 提纯 硒 幽门螺杆菌 空泡毒素 重组 影响 Helicobacter pylori VacA selenium 凋亡作用 诱导细胞 生长抑制 结构 加深 颜色 硒浓度 红色色素 脂溶性 细胞数量 集落形成率 细胞分裂指数 抑制作用 |
Effects of selenium on VacA and recombinanted VacA of Helicobacter pylori |
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