| 华支睾吸虫mGST新基因的克隆、表达与纯化 |
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| 引用本文： | 伍忠銮,吴德,吴忠道,徐劲,余新炳.华支睾吸虫mGST新基因的克隆、表达与纯化[J].中国寄生虫病防治杂志,2005,18(5):345-347. |
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| 作者姓名： | 伍忠銮 吴德 吴忠道 徐劲 余新炳 |
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| 作者单位： | [1]中山大学基础医学院寄生虫学教研室,广东广州510089 [2]中山大学生命科学学院生物科学与技术系,广东广州510089 |
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| 基金项目： | The project were supported by the First Research Team Foundation of the Natural Science Foundation of Guangdong Province （No.2001）; Key Programme Foundation of Social Development of Department of Science and Technology of Guangdong Province（No. 2002B31005）; Key Technologies R＆D Programme Foundation of Guangzhou（No.200223-E4022）. |
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| 摘 要： | 目的扩增华支睾吸虫一个微粒体谷胱甘肽转移酶（mGST）新基因,明确是否存在内含子,并进行原核表达与纯化. 方法用PCR方法分别从华支睾吸虫成虫cDNA（质粒）文库和基因组DNA中扩增mGST基因并测序,将编码基因定向克隆到原核表达载体pET-30a（＋）,在大肠埃希菌BL21/DE3中表达,按照Ni-NTA agarose说明书纯化重组蛋白,用SDS-PAGE和TLC分析. 结果 mGST基因全长486 bp,没有内含子,构建的原核表达质粒pET-30a（＋）-mGST在大肠埃希菌中得到了有效表达,融合蛋白的分子质量单位约为24 ku.重组蛋白达细菌总蛋白质的11%,纯化后的重组蛋白纯度为83%. 结论 mGST基因没有内含子,在大肠埃希菌中能有效表达,得到了纯化的重组蛋白,为进一步研究其功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 华支睾吸虫 谷胱甘肽转移酶 克隆 基因表达 纯化 |
| 文章编号： | 1001-6627（2005）05-0345-03 |
| 收稿时间： | 2005-04-25 |
| 修稿时间： | 2005-08-28 |
CLONING, EXPRESSION AND PURIFICATION OF A NOVEL GENE OF mGST FROM CLONORCHIS SINENSIS |
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| WU Zhong-luan , WU De , WU Zhong-dao , XU Jin , YU Xin-bing.CLONING, EXPRESSION AND PURIFICATION OF A NOVEL GENE OF mGST FROM CLONORCHIS SINENSIS[J].Chinese Journal of Parasitic Disease Control,2005,18(5):345-347. |
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| Authors: | WU Zhong-luan WU De WU Zhong-dao XU Jin YU Xin-bing |
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| Institution: | 1. Department of Parasitology, School of Pre-Clinical Medicine, SUN Yat-sen University, Guangzhou 510089, China ; 2. Department of Biology and Biotechnology , School of Life Science, SUN Yat Sen University, Guangzhou 510275 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Clonorchis sinensis glutathione transferase cloning gene expression purification |
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