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| 人肝细胞生长因子mRNA实时荧光PCR定量标准的构建 | |
| 引用本文： | 岑东,吕建新,裴仁治,刘东海,张顺,陆永绥. 人肝细胞生长因子mRNA实时荧光PCR定量标准的构建[J]. 温州医学院学报, 2004, 34(3): 163-166 |
| 作者姓名： | 岑东 吕建新 裴仁治 刘东海 张顺 陆永绥 |
| 作者单位： | 1. 温州医学院检验医学与公共卫生学院,浙江,温州,325035 2. 浙江省鄞州人民医院,浙江,宁波,315040 3. 宁波市临床医学研究中心,浙江,宁波,315010 |
| 摘 要： | 目的:构建实时荧光定量PCR(FQ-PCR)标准以定量检测人肝细胞生长因子mRNA的表达.方法:采用RT-PCR法利用肝组织提取的总RNA制备肝细胞生长因子cDNA目的片段.与pGEM-TEasy Vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α.联合用直接PCR、α互补和氨苄青霉素筛选法、EcoRI限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性.测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备FQ-PCR梯度浓度参考标准.结果:HGF cDNA目的片段成功制备并获得稳定的重组质粒,保持了目的片段的特异性和序列完整性.结论:成功构建了实时FQ-PCR定量参考标准. |
| 关 键 词： | 肝细胞生长因子 参考标准 |
| 文章编号： | 1000-2138(2004)03-0163-04 |
| 修稿时间： | 2003-07-04 |
Construction of the standards for detecting human hepatocyte growth factor mRNA with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction |
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| CEN Dong,LV Jian-xin,PEI Ren-zhi,et al.. Construction of the standards for detecting human hepatocyte growth factor mRNA with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction[J]. Journal of Wenzhou Medical College, 2004, 34(3): 163-166 | |
| Authors: | CEN Dong LV Jian-xin PEI Ren-zhi et al. |
| Affiliation: | CEN Dong,LV Jian-xin,PEI Ren-zhi,et al. School of Clinical Laho-ratory Medicine and Public Healthy,Wenzhou Medical College,Wenzhou 325035 |
| Abstract: | |
| Keywords: | mRNA PCR |
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