PDTC可改变TNF-α诱导的eNOS基因表达下调

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中内皮型一氧化氮合酶基因（eNOS）表达的作用以及PDTC对此作用的改变。方法将培养的内皮细胞分为3组：1组为无任何处理的HUVEC,2组为子痫前期（PE）患者血清作用的HUVEC,3组为用正常晚孕妇女血清作用的HUVEC。用逆转录-聚合酶链反应检测三组细胞中eNOS mRNA的表达。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测PE患者和正常孕妇血清中TNF-α含量。用1ng/ml、3ng/ml、5ng/ml 3种浓度的TNF-α分别作用三组细胞6h,以及用浓度为3ng/ml的TNF-α作用三组细胞分别长达6h、12h、24h,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测eNOS mRNA的表达;将二硫代氨基甲酸吡硌烷（PDTC,5mmol/ml）与TNF-α（3ng/ml）同时作用以及TNF-α（3ng/ml）单独作用三组细胞6h,RT-PCR检测eNOS基因mRNA的表达。结果三组细胞中都有eNOS表达,2组表达量显著低于1组和3组（P〈0.01）。ELISA结果显示,PE患者血清中TNF-α含量显著高于正常晚孕妇女（P〈0.01）。TNF-α作用HUVEC细胞后eNOS表达显著低表达,并成时间和剂量依赖关系（P〈0.01）。PDTC和TNF-α同时作用的HUVEC和TNF-α单独作用的HUVEC相比,其eNOS表达显著增高（P〈0.01）。结论可下调eNOS在HUVEC中的表达,PDTC可改变TNF-α诱导的eNOSN表达的下调。