| 组织蛋白酶L基因真核表达质粒的构建与鉴定 |
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| 作者姓名： | 王素梅 李力 张玮 黎丹戎 唐步坚 |
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| 作者单位： | 广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021;广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021;广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021;广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021;广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科,南宁,530021 |
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| 摘 要： | 目的:构建组织蛋白酶L(CTSL)基因的真核表达质粒并进行表达鉴定.方法:采用RT-PCR技术从人卵巢癌组织总RNA中逆转录CTSL基因的cDNA全长,克隆到pMDl8-T载体上;亚克隆至pcI)NA3.1载体,重组阳性克隆进行酶切及测序鉴定,重组质粒瞬时转染HO8910细胞,RT-PCR和westeIn-blot检测CTSL基因和蛋白表达.结果:PCR克隆出CTSL cDNA全长,成功克隆人pMD18-T载体,亚克隆至pcDNA3.1载体,重组阳性克隆酶切及测序鉴定证实CTSL基因已正确插入pcD-NA3.1载体.RT-PCR和Western-blot结果证实CTSL基因能够在HO8910细胞中正确表达.结论:成功构建了CTSL基因的真核表达质粒,为下一步探讨CTSL基因在卵巢癌中的作用提供了实验基础.
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| 关 键 词： | 组织蛋白酶L 真核表达 构建 卵巢癌 |
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