| 反义肽核酸阻抑线粒体基因表达诱导肺癌SPC细胞凋亡的实验研究 |
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| 引用本文： | 王光辉,黄桂君,余时沧,张志远,钱桂生.反义肽核酸阻抑线粒体基因表达诱导肺癌SPC细胞凋亡的实验研究[J].重庆医科大学学报,2009,34(11). |
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| 作者姓名： | 王光辉 黄桂君 余时沧 张志远 钱桂生 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学新桥医院呼吸内科研究所,重庆,400037
2. 第三军医大学西南医院病理研究所,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 目的:探讨以反义肽核酸(Anti-sense peptide nucleic acid,asPNA)封闭肺癌SPC-A1细胞线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)转录启动子后,对其生物学特性的影响.方法:合成针对mtDNA重链转录启动子区的asPNA,构建asPNA-三苯磷复合物并鉴定,以该复合物转染人肺腺癌SPC-A1细胞系.激光共聚焦显微镜确定该复合物的亚细胞定位,RT-PCR检测转染48h后对mtDNA编码基因转录的影响,流式细胞术评估细胞周期分布及凋亡/坏死情况,自发光荧光仪检测细胞内ATP浓度,以未转染asPNA-三苯磷复合物的肺腺癌SPC-A1细胞为对照.结果:成功获得asPNA-三苯磷复合物,激光共聚焦显微镜显示该复合物顺利进入SPC-A1细胞线粒体;同未转染组相比,转染组SPC-A1细胞mtDNA编码基因的转录水平有所下降,而细胞内ATP浓度明显降低(P＜0.01);同时,细胞周期分析显示,转染组出现明显的亚二倍体峰,而Annexin V-PI双标结果进一步证实,转染组肺癌细胞凋亡率明显增加.结论:asPNA在电子移位亲脂性阳离子-三苯磷的运载下,能够进入SPC-A1细胞线粒体并阻抑其mtDNA编码基因的转录,进而影响肺癌细胞的能量合成并诱导其凋亡.
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| 关 键 词： | 肺癌 反义肽核酸 线粒体 转录 凋亡 |
The effect of blocking the expression of mtDNA on lung cancer SPC-A1 cell by antisense peptide nucleic acid |
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