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| TGF-βRⅡ/Fc融合基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 李圣青,李焕章,杨乔欣,王吉村,倪殿涛,戚好文.TGF-βRⅡ/Fc融合基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达[J].第四军医大学学报,2002,23(4):371-375. |
| 作者姓名： | 李圣青 李焕章 杨乔欣 王吉村 倪殿涛 戚好文 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院呼吸内科,陕西,西安,710033 2. 第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033 3. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033 |
| 摘 要： | 目的 构建TGF-βRⅡ/FC融合基因的真核表达载体pIg-TRⅡ，使其在中国仓鼠肾细胞（CHO）中呈分泌性表达，为肺间质纤维化基因治疗的研究奠定基础。方法 采用RT-PCR方法从正常人肺组织中扩增出目的基因TGF-βRⅡcDNA的胞膜外部分，再将TGF-βRⅡcDNA片段亚克隆到pIg真核表达载体，该载体在其多克隆位点下游含有人IgG1Fc基因组片段，由此可形成TGF-βRⅡ/FC融合基因；采用脂质体转染技术转染CHO细胞使其瞬时表达融合蛋白；应用细胞免疫荧光技术检测融合蛋白的表达；采用免疫沉淀的方法检测CHO细胞培养上清内融合蛋白的表达。结果 DNA测序结果在Blast上作同源性比较证明插入片段就是TGF-βRⅡcDNA的胞膜外部分，细胞免疫荧光染色呈阳性反应，CHO细胞培养上清内检测到融合蛋白的表达。结论 pIg-TRⅡ真核表达载体构建成功，并能够在CHO细胞中分泌性表达有活性的融合蛋白TGF-βRⅡ/FC。 |
| 关 键 词： | 间质性肺疾病 肺纤维化 受体 转化生长因子β 克隆 真核细胞 |
| 文章编号： | 1000-2790(2002)04-0371-05 |
| 修稿时间： | 2001年11月27 |
Construction of eukaryotic expression vector of fusion gene TGF-βRⅡ/Fc and its expression in CHO cells |
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| LI Sheng Qing ,LI Huan Zhang ,YANG Qiao Xin ,WANG Ji Cun ,NI Dian Tao ,QI Hao Wen.Construction of eukaryotic expression vector of fusion gene TGF-βRⅡ/Fc and its expression in CHO cells[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2002,23(4):371-375. | |
| Authors: | LI Sheng Qing LI Huan Zhang YANG Qiao Xin WANG Ji Cun NI Dian Tao QI Hao Wen |
| Institution: | LI Sheng Qing 1,LI Huan Zhang 1,YANG Qiao Xin 2,WANG Ji Cun 3,NI Dian Tao 1,QI Hao Wen 1 1Department of Respirations,Xijing Hospital,2Department of Microbiology,3Department of Biochemistry and Molecular Biology |
| Abstract: | |
| Keywords: | lung diseases interstitial pulmonary fibrosis receptors transforming growth factor beta cloning molecular eukaryotic cells |
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