| 白介素1受体相关激酶4重组过表达质粒pcDNA3.1-IRAK4的构建及转染 |
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| 引用本文： | 袁园,廖海含,吴青青,卞洲艳,杨政,代亚文,唐其柱. 白介素1受体相关激酶4重组过表达质粒pcDNA3.1-IRAK4的构建及转染[J]. 医学研究杂志, 2016, 45(4): 42-45 |
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| 作者姓名： | 袁园 廖海含 吴青青 卞洲艳 杨政 代亚文 唐其柱 |
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| 作者单位： | 430060 武汉大学人民医院心血管内科;430060 武汉大学人民医院心血管内科;430060 武汉大学人民医院心血管内科;430060 武汉大学人民医院心血管内科;430060 武汉大学人民医院心血管内科;430060 武汉大学人民医院心血管内科;430060 武汉大学人民医院心血管内科 |
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| 基金项目： | 教育部博士点基金资助项目(优先发展领域)(20130141130010);湖北省医学领军人才培养工程专项基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建重组过表达质粒pc DNA3.1-IRAK4并检验其在H9c2细胞中的表达。方法在全球科学家质粒共享非盈利组织Addgene申请到p DONR223-IRAK4质粒菌种,摇菌提取质粒后测序。设计引物将目的片段扩增并跑胶回收。将目的片段PCR扩增产物和空质粒pc DNA3.1采用Bam HⅠ和EcoRⅠ酶切,构建重组表达质粒。将重组质粒使用两种转染试剂转染入H9c2细胞中,并借助Western blot法检测IRAK4蛋白在H9c2细胞中的表达。结果重组过表达质粒经菌落PCR、序列测定证实,扩增基因片段IRAK4与基因数据库中序列一致,并且含有终止密码子。转染入H9c2细胞中能够过表达,表明IRAK4重组过表达质粒构建成功。结论成功构建IRAK4基因过表达重组质粒,获得外源性IRAK4转染的H9c2细胞。
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| 关 键 词： | IRAK4 基因转染 质粒 |
| 收稿时间： | 2015-09-16 |
| 修稿时间： | 2015-10-15 |
Construction of Recombinant IRAK4 Overexpressed Plasmids and Validation of Their Transfection to H9c2 Cardiomyoblasts |
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| Yuan Yuan,Liao Haihan,Wu Qingqing. Construction of Recombinant IRAK4 Overexpressed Plasmids and Validation of Their Transfection to H9c2 Cardiomyoblasts[J]. Journal of Medical Research, 2016, 45(4): 42-45 |
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| Authors: | Yuan Yuan Liao Haihan Wu Qingqing |
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| Affiliation: | Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Hubei 430060, China;Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Hubei 430060, China;Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Hubei 430060, China;Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Hubei 430060, China;Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Hubei 430060, China;Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Hubei 430060, China;Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Hubei 430060, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | IRAK4 Gene transfection Plasmid |
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