碱性成纤维细胞生长因子2对大鼠脂肪干细胞向成牙本质样细胞分化的影响及其机制研究

【目的】探讨碱性成纤维细胞生长因子2(FGF-2)对大鼠脂肪干细胞(ADSCs)向成牙本质样细胞分化的影响及其机制。【方法】取大鼠双侧腹股沟处脂肪组织,分离、鉴定ADSCs,取第3代ADSCs随机分为空白对照组(NG组)、阴性对照组(siRNA-NC组)、沉默FGF-2表达组(TGF-2-siRNA组)、通路激活剂组。实时荧光定量PCR法检测各组ADSCs中FGF-2表达水平;CCK-8法检测各组ADSCs增殖情况;采用茜素红染色观察各组ADSCs成牙本质诱导分化情况;采用蛋白免疫印迹法、酶联免疫吸附法(ELISA)法检测神经菌毛素1(NRP1)、牙本质涎蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白1(DMP1)及无翅型MMTV整合位点家族成员蛋白/β-连环素(Wnt/β-catenin)通路蛋白表达水平。【结果】成功分离并鉴定ADSCs;与NG组、siRNA-NC组比较,FGF-2-siRNA组、通路激活剂组ADSCs中FGF-2mRNA、NRP1、DSPP、DMP1、β-catenin蛋白及Wnt水平均降低(P<0.05),ADSCs增殖抑制率升高(P<0.05);与FGF-2-siRNA组比较,通路激活剂组ADSCs中FGF-2mRNA、NRP1、DSPP、DMP1、β-catenin蛋白及Wnt水平均升高(P<0.05),ADSCs增殖抑制率降低(P<0.05)。【结论】FGF-2可影响Wnt/β-catenin通路活化,可能与大鼠ADSCs增殖及向成牙本质样细胞分化有关,可为临床治疗牙齿缺损提供新的思路。