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四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白转基因斑马鱼模型建立
引用本文:张力,刘超,周昕,谢英,刘树锋,徐增年. 四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白转基因斑马鱼模型建立[J]. 实验动物与比较医学, 2015, 23(1): 81-85
作者姓名:张力  刘超  周昕  谢英  刘树锋  徐增年
作者单位:河北医科大学实验动物学部,河北医科大学实验动物学部,.华中科技大学同济医学院遗传学系,河北医科大学实验动物学部,河北医科大学实验动物学部,河北医科大学实验动物学部
基金项目:河北省科技条件建设项目
摘    要:目的 探索tet-on四环素诱导表达系统在斑马鱼体内应用策略与技术路线,构建四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼,为条件型功能基因研究及组织特异转基因斑马鱼疾病模型的建立奠定基础。方法 构建肝脏特异启动子fabp10启动rtTA蛋白表达的重组质粒pfabp10-rtTA,联合pTRE-Tight-BI-AcGFP1质粒转染HeLa细胞后给予doxycycline诱导,Western blot法验证;pfabp10-rtTA联合pTRE-Tight-BI-AcGFP1质粒注射斑马鱼1-细胞期受精卵后,30礸/ml doxycycline诱导,荧光筛选稳定整合个体。结果 共转染pfabp10-rtTA与 pTRE-Tight-BI-AcGFP1的HeLa细胞经1礸/ml浓度doxycycline诱导培养液诱导, GFP表达量显著高于不加doxycycline培养液对照组;筛选获得的稳定整合斑马鱼幼鱼,在浓度为30礸/ml doxycycline条件下,肝脏明显有绿色荧光表达,对照组幼鱼肝脏位置未有明显绿色荧光。结论Tet-On四环素诱导表达系统可用于建立四环素调控斑马鱼肝脏特异表达外源基因;利用该技术可建立诱导肝脏表达GFP建立转基因斑马鱼品系,为建立条件型转基因斑马鱼疾病模型、探索肝脏器官发生发育等研究提供良好的模式动物工具

关 键 词:斑马鱼;四环素诱导系统;肝脏;绿色荧光蛋白
收稿时间:2014-09-19
修稿时间:2014-10-23

Establishment of a transgenic zebrafish model with tetracycline-induced GFP expression in the liver
ZHANG Li,LIU Chao,ZHOU Xin,XIE Ying,LIU Shu-feng and XU Zeng-nian. Establishment of a transgenic zebrafish model with tetracycline-induced GFP expression in the liver[J]. Laboratory Animal and Comparative Medicine, 2015, 23(1): 81-85
Authors:ZHANG Li  LIU Chao  ZHOU Xin  XIE Ying  LIU Shu-feng  XU Zeng-nian
Affiliation:Hebei Key Lab of Laboratory Animal Science, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China;Hebei Key Lab of Laboratory Animal Science, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China;Department of Medical Genetics, Tongji Medical College; Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430032, China;Hebei Key Lab of Laboratory Animal Science, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China;Hebei Key Lab of Laboratory Animal Science, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China;Hebei Key Lab of Laboratory Animal Science, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China
Abstract:
Keywords:zebrafish   tet on   liver   GFP
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