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黄河裸裂尻鱼MSTN基因RNA干扰研究
引用本文:孔庆辉,晁燕,夏明哲,祁得林. 黄河裸裂尻鱼MSTN基因RNA干扰研究[J]. 实验动物与比较医学, 2016, 24(4): 344-350
作者姓名:孔庆辉  晁燕  夏明哲  祁得林
作者单位:青海大学,青海大学,青海大学,青海大学
摘    要:目的 利用反义寡合甘酸技术抑制肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)的表达,评估MSTN基因的沉默效果,并检测RNA干扰后对下游基因的影响。方法 通过构建黄河裸裂尻鱼(Schizopygopsis pylzovi)MSTN基因RNA干扰(RNAi)重组腺病毒载体1P3(DSP MSTN 273+250+1737)和1P2(DSP MSTN 195+1670),并将其注射黄河裸裂尻鱼肌肉组织,进行活体RNA干扰;利用Real-time PCR和Western-blotting评估MSTN基因的沉默效果,并检测MSTN基因RNA干扰后肌肉肌酸激酶(muscle-type creatine kinase, M-CK)基因转录水平的调控作用。结果 Real-time PCR分析结果表明,与HK组(病毒通用阴性对照组)和N组(空白对照组)相比,重组腺病毒载体1P3对黄河裸裂尻鱼肌肉MSTN基因的转录具有明显的干扰作用(P<0.05),抑制率达53.5%;而重组腺病毒载体1P2对MSTN基因的转录无明显干扰作用(P>0.05)。Western-blotting分析结果与Real-time PCR结果相一致。同时,经1P3干扰后随着MSTN基因转录水平的下降,其肌肉肌酸激酶M-CK基因表达水平显著上升。结论 通过RNAi技术能够有效的抑制MSTN基因的表达,并能够上调M-CK基因的表达量。因此,证明了在黄河裸裂尻鱼中MSTN能够抑制M-CK的转录。揭示高原土著鱼类MSTN 基因的对肌肉的生长发育起到调控作用。

关 键 词:黄河裸裂尻鱼;RNA干扰;肌肉生长抑制;肌酸激酶;表达
收稿时间:2016-01-08
修稿时间:2016-02-18

Inhibitory effect of RNA interference of MSTN gene expression on the downstream genes in Schizopygopsis pylzovi
KONG Qing-hui,CHAO yan,XIA Ming-zhe and QI De-lin. Inhibitory effect of RNA interference of MSTN gene expression on the downstream genes in Schizopygopsis pylzovi[J]. Laboratory Animal and Comparative Medicine, 2016, 24(4): 344-350
Authors:KONG Qing-hui  CHAO yan  XIA Ming-zhe  QI De-lin
Affiliation:Animal Science Department of Agriculture and Animal Husbandry College, Qinghai University, Xining 810016, China;Animal Science Department of Agriculture and Animal Husbandry College, Qinghai University, Xining 810016, China;College of Eco-Environmental Engineering, Qinghai University, Xining 810016;Animal Science Department of Agriculture and Animal Husbandry College, Qinghai University, Xining 810016, China
Abstract:
Keywords:Schizopygopsis pylzovi   RNA interference   Myostatin   Creatine kinase   Expression
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