| 摘 要： | 目的:研究RNAi技术沉默Survivin基因对人肺癌细胞株H1299增殖和凋亡的影响。方法:将Survivin特异性siRNA表达载体siRNA-Sur转染H1299细胞,利用倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率,通过Western blot和Realtime-PCR方法检测RNAi沉默Survivin基因表达的效果,MTT法检测RNAi沉默Survivin基因对基因H1299细胞增殖的影响,采用流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡。结果:siRNA-Sur转染H1299细胞48 h后,细胞的Survivin基因表达明显减少,空白对照组Survivin mRNA的相对表达量为1.0,siRNA-空白对照组为0.98,而siRNA-Sur组为0.32(P0.01);导致H1299细胞G2期阻滞,空白对照组为23.7%,而siRNA-Sur组为50.1%(P0.01);细胞抑制率和凋亡率增加,转染48 h,空白对照组凋亡率为5.8%,无关对照组为6.2%,而siRNA-Sur组达50.6%(P0.01)。结论:RNAi沉默H1299细胞Survivin基因表达抑制细胞增殖,并诱导H1299细胞凋亡。
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