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错配修复基因hMLH1启动子萤光素酶报告基因载体的构建与鉴定
引用本文:卢俊宇,金鹏,高巍,陆晓娟,王亚婷,盛剑秋.错配修复基因hMLH1启动子萤光素酶报告基因载体的构建与鉴定[J].基础医学与临床,2012,32(4):338-341.
作者姓名:卢俊宇  金鹏  高巍  陆晓娟  王亚婷  盛剑秋
作者单位:北京军区总医院消化内科;第三军医大学;北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(81072041);医学分子生物学国家重点实验室专项经费(2060204)
摘    要: 目的:构建含hMLH1启动子片段的萤光素酶报告基因载体,并检测其在雌激素诱导下的转录活性。方法:以正常人基因组DNA为模板,PCR扩增hMLH1启动子片段(-1953/+53),插入萤光素酶报告基因载体pGL3-Basic,将重组质粒转入HEK293细胞,检测在有和无雌激素诱导下萤光素酶的活性变化。结果:酶切和测序结果证实重组萤光素酶报告基因载体pGL3-Promoter1-luc构建成功。转染pGL3-Promoter1-luc后,雌激素诱导的萤光素酶活性为7.45±0.81,显著高于无水乙醇组的3.28±0.19 (n=3,P<0.001)。结论:hMLH1启动子片段存在与雌激素相关的调控序列。

关 键 词:错配修复基因  hMLH1  启动子  雌激素  双萤光素酶报告基因  

Construction and identification of luciferase reporter gene vector containing hMLH1 promoter
LU Jun-yu,JIN Peng,GAO Wei,LU Xiao-juan,WANG Ya-ting,SHENG Jian-qiu.Construction and identification of luciferase reporter gene vector containing hMLH1 promoter[J].Basic Medical Sciences and Clinics,2012,32(4):338-341.
Authors:LU Jun-yu  JIN Peng  GAO Wei  LU Xiao-juan  WANG Ya-ting  SHENG Jian-qiu
Institution:1(1.Dept.of Gastroenterology,General Hospital of Beijing Military Region,Beijing 100700;2.Third Military Medical University,Chongqing 400038; 3.National Laboratory of Medical Molecular Biology,Institute of Basic Medical Sciences,CAMS & PUMC,Beijing 100005,China)
Abstract:
Keywords:mismatch repair gene  hMLH1  promoter  estrogen  dual-luciferase reporter gene
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