| 人NaDC1基因近端启动子生物信息学分析及载体构建 |
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| 引用本文： | 杨聚荣,张剑凯,何娅妮,李新伦,梁海君,林静.人NaDC1基因近端启动子生物信息学分析及载体构建[J].第三军医大学学报,2007,29(14):1410-1412. |
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| 作者姓名： | 杨聚荣 张剑凯 何娅妮 李新伦 梁海君 林静 |
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| 作者单位： | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科,重庆,400042;广东医学院基础学院解剖学教研室,湛江,524023 |
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| 摘 要： | 目的对人NaDC1（hNaDC1）基因近端启动子进行生物信息学分析,预测可能的调控区域及顺式元件,并构建相应基因序列萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。方法使用First EF程序分析并获得hNaDC1基因近端启动子序列,使用MatInspector5.0软件对近端启动子序列中的转录因子结合位点进行预测。PCR法扩增hNaDC1基因近端启动子序列,PCR产物经KpnⅠ和HindⅢ双酶切后定向克隆到pGL3-Basic载体。重组质粒行KpnⅠ和HindⅢ双酶切及测序鉴定。结果使用FirstEF程序获得长度为2.4kb（-2232/＋136）的hNaDC1基因近端启动子序列。MatInspector5.0程序分析显示该基因序列共含有152个74种顺式作用元件。KpnⅠ和HindⅢ双酶切及测序鉴定证实构建的pGL3-hNaDC1A质粒插入片段正确无误。结论成功构建hNaDC1基因近端启动子转录调控序列萤火虫荧光素酶报告基因表达载体,为利用双荧光素酶报告基因检测系统研究hNaDC1基因近端启动子转录调控元件的分布及其性质提供了基本试验条件。
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| 关 键 词： | hNaDC1基因 转录调控 报告基因 |
| 文章编号： | 1000-5404（2007）14-1410-03 |
| 修稿时间： | 2006-09-302006-10-15 |
Bioinformatics analysis of human NaDC1 proximal promoter and construction of firefly report gene vector |
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| YANG Ju-rong,ZHANG Jian-kai,HE Ya-ni,LI Xin-lun,LIANG Hai-jun,LIN Jing.Bioinformatics analysis of human NaDC1 proximal promoter and construction of firefly report gene vector[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2007,29(14):1410-1412. |
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| Authors: | YANG Ju-rong ZHANG Jian-kai HE Ya-ni LI Xin-lun LIANG Hai-jun LIN Jing |
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| Institution: | 1 Department of Nephrology, Institute of Surgery Research, Daping Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400042; 2 Department of Atomany, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023, China |
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