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N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基口服基因疫苗的制备和激活SD大鼠产生循环抗体的初步报告
引用本文:田士强,王任直,李桂林,张波,姚勇,窦万臣,孔燕国,张振兴,栗世方.N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基口服基因疫苗的制备和激活SD大鼠产生循环抗体的初步报告[J].中国神经免疫学和神经病学杂志,2004,11(4):224-226,238.
作者姓名:田士强  王任直  李桂林  张波  姚勇  窦万臣  孔燕国  张振兴  栗世方
作者单位:中国医学科学院,中国协和医科大学,北京协和医院神经外科,北京,100730
基金项目:国家自然科学基金资助课题 ( 3 0 2 713 3 0,3 0 170 960 )
摘    要:目的研制携带N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl,D-aspartate receptor subunit 1,NR1)的口服疫苗,探讨疫苗激活SD大鼠产生循环抗体的可能性。方法采用聚合酶链反应、酶切连接和蓝白筛选的方法构建NR1的表达载体;以磷酸钙共沉淀的方法转染HEK293细胞,并用G418筛选阳性细胞克隆;应用逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色方法鉴定阳性细胞株;经氯化钙法制备携带NR1表达载体的减毒鼠伤寒沙门(氏)菌口服疫苗(SL—NR1);胃内灌注600μL、D(λ)260nm为0.6的SL—NR1,2周内4次给药;以阳性细胞株为靶细胞,用免疫荧光方法检测大鼠循环中NR1抗体滴度。结果扩增出NR1基因并构建了含有NR1基因的表达载体——pCDNA3.1-NR1;建立了细胞株HEK 293-NR1;证实口服疫苗可激活SD大鼠(23/25只)产生NR1抗体。结论成功研制了携带NR1基因的口服减毒鼠伤寒沙门(氏)菌活疫苗,其可激活机体免疫反应产生NR1抗体。

关 键 词:N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基  口服疫苗  循环抗体
文章编号:1006-2963(2004)04-0224-04

A Preliminary Report of the Production of Oral Vaccine Carrying the NR1 Gene and Its Role on Producing NR1 Antibodies in SD Rats
TIAN Shi-qiang,WANG Ren-zhi,LI Gui-lin,ZHANG Bo,YAO Yong,DOU Wan-chen,KONG Yan-guo,ZHANG Zhen-xing,LI Shi-fang.A Preliminary Report of the Production of Oral Vaccine Carrying the NR1 Gene and Its Role on Producing NR1 Antibodies in SD Rats[J].Chinese Journal of Neuroimmunology and Neurology,2004,11(4):224-226,238.
Authors:TIAN Shi-qiang  WANG Ren-zhi  LI Gui-lin  ZHANG Bo  YAO Yong  DOU Wan-chen  KONG Yan-guo  ZHANG Zhen-xing  LI Shi-fang
Abstract:
Keywords:NMDAR1 NR1 subunit  oral vaccine  NR1 antibody
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