结核分枝杆菌噬菌体试剂盒的研制与初步评价 |
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引用本文: | 彭丽,沈小兵,罗永艾,王国治. 结核分枝杆菌噬菌体试剂盒的研制与初步评价[J]. 重庆医科大学学报, 2010, 35(3) |
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作者姓名: | 彭丽 沈小兵 罗永艾 王国治 |
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作者单位: | 重庆医科大学附属第一医院呼吸科,重庆,400016;中国药品生物制品检定所菌苗室,北京,100050 |
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摘 要: | 目的:研制能快速检测标本中结核分枝杆菌的噬菌体试剂盒,并对之在临床上的应用做出初步评价.方法:采用不同方法对噬菌体的生产和保存工艺进行探讨,并且观察该方法中所用试剂的稳定性.建立噬菌体快速检测结核分枝杆菌的方法,分别用噬菌体法与传统培养法检测34份临床标本中的结核分枝杆菌,以培养法作为金标准观察噬菌体法的敏感度、特异度和符合率.结果:①在37℃环境中采用琼脂双层法进行噬菌体扩增生产,48 h后采用孵育-过滤法收集,可以获得较为理想的产量且简单易行.②噬菌体以液体形式4℃保存或以噬菌体宿主菌的无细胞菌苗作为保护剂进行真空冻干后4℃保存,28周后效价下降不足10的一个数量级.③噬菌体法中的重要试剂:辅助细菌和杀病毒剂,4℃保存40周均具有良好的稳定性.④34份痰标本培养4周,其中 2份污染,29份阳性,3份阴性;噬菌体法检测标本中结核分枝杆菌的敏感度、特异度和符合率分别为86.2%(25/29)、66.7%(2/3)、84.4%(27/32).结论:噬菌体法在48 h内可以快速检测标本中的结核分枝杆菌活菌,并且具有以试剂盒形式进行商业化生产的可行性,将有助于临床结核病的快速诊断.
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关 键 词: | 噬菌体 分枝杆菌 结核 诊断 |
A study and evaluation of bacteriophage's utilization in rapid detection of Mycobacterium tuberculosis |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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