川芎嗪对肝星状细胞基质金属蛋白酶13和金属蛋白酶组织抑制剂1

背景：既往动物实验表明，川芎嗪能降低肝纤维化大鼠血清Ⅲ型胶原、透明质酸及层粘连蛋白水平，延缓肝纤维化的形成，但其具体作用机制尚不清楚。 目的：观察川芎嗪对肝星状细胞增殖及基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA表达的影响，并探讨川芎嗪抗肝纤维化的可能机制。 设计、时间及地点：观察性实验，于2006-11/2007-06在重庆医科大学基础医学研究所完成。 材料：盐酸川芎嗪注射液(10 mL∶80 mg)，使用时用含体积分数为0.1小牛血清的1640培养基稀释，为巴里莫尔制药(通化)有限公司产品；肝星状细胞株HSC-T6，系SV40转染SD大鼠肝星状细胞而成，其表型为活化的肝星状细胞，由中国医学科学院肿瘤研究所提供。 方法：培养肝星状细胞株，传至三四代时增殖明显即可用于实验。实验分为2组，空白对照组：仅加入细胞；药物干预组：分别加入川芎嗪0.01，0.1，1，10，50，100，200，400，600，1 000 mg/L后作用于HSC-T6。 主要观察指标：四甲基偶氮唑盐比色法测定肝星状细胞增殖；ELISA法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原及透明质酸质量浓度；反转录-聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶13 mRNA的表达。 结果：①与空白对照组相比，川芎嗪100~1 000 mg/L各剂量组作用不同时间的吸光度值均降低(P < 0.01)。在川芎嗪100~1 000 mg/L 这一质量浓度范围内，随着药物质量浓度加大，对细胞的抑制作用增加。②川芎嗪(100，200 mg/L)对Ⅰ、Ⅲ型胶原、透明质酸的产生有抑制作用(P < 0.05~0.01)，并随着药物质量浓度增加，抑制作用增强。10 mg/L川芎嗪对Ⅰ、Ⅲ型胶原均没有影响，但可以降低透明质酸质量浓度(P < 0.05)。③100，200 mg/L川芎嗪可促进基质金属蛋白酶13的表达，随药物质量浓度增大，基质金属蛋白酶13/基质金属蛋白酶组织抑制因子1比值增大(P < 0.05~0.01)。 结论：川芎嗪抗纤维化的可能机制是抑制肝星状细胞的增殖；促进基质金属蛋白酶13的表达，从而促进胶原降解，使细胞外基质减少。

Effects of tetramethylpyrazine on matrix metalloproteinase-13 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 expression in hepatic stellate cells