重组人前脑啡肽原基因腺相关病毒载体的构建 |
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引用本文: | 杨辉,田玉科,王鹏,安珂,高峰,吴小兵,梅伟.重组人前脑啡肽原基因腺相关病毒载体的构建[J].中华麻醉学杂志,2005,25(1):34-36. |
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作者姓名: | 杨辉 田玉科 王鹏 安珂 高峰 吴小兵 梅伟 |
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作者单位: | 1. 430030,武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室 2. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助(30170905)
湖北省科技攻关重点项目(2003AA301C52) |
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摘 要: | 目的 构建重组人前脑啡肽原基因(hPPE)腺相关病毒载体(AAV)。方法 构建质粒骨架上含有新霉素抗性基因表达盒的重组腺相关病毒(rAAV)载体质粒pSNAV-hPPE并酶切鉴定,转染金黄地鼠胚胎肾细胞(BHK 21),后用G418筛选培养形成稳定携带rAAV载体的混合细胞株BHK/SH1;再用HSV1-rc/△UI2感染、包装此细胞株并收获病毒载体rAAV-hPPE,并行DNA探针点杂交测定病毒滴度。结果 酶切鉴定pSNAV-hPPE重组成功,病毒滴度为2.5×1012v.g./ml。结论 获得的rAAV-hPPE滴度高,感染性好,可以用于转基因镇痛的实验研究。
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关 键 词: | 脑啡肽类 腺病毒科 遗传载体 |
Construction of recombinant adeno-associated virus vector with human preproenkephalin gene |
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Abstract: | |
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Keywords: | Enkephalins Adeno viridae Genetic vectors |
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