| 血管内皮细胞生长因子在哺乳动物细胞的表达 |
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| 引用本文： | 顾洪,蔡在龙,陈少萍,邹鲁峰,宋春桥,毛积芳. 血管内皮细胞生长因子在哺乳动物细胞的表达[J]. 第二军医大学学报, 1999, 20(10): 777-779 |
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| 作者姓名： | 顾洪 蔡在龙 陈少萍 邹鲁峰 宋春桥 毛积芳 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学基础医学部生物化学教研室,上海,200433
2. 第二军医大学长海医院心血管内科 |
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| 摘 要： | 目的：本实验试图构建具有生物学活性的ＶＥＧＦ真核表达载体，为ＶＥＧＦ基因治疗提供载体。方法：将已获得的ｈＶＥＧＦ１６５ ｃＤＮＡ克隆到ＧＳＴ融合表达载体，构建原核表达质粒，转染大肠杆菌ＤＨ５α，ＩＰＴＧ诱导表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定表达产物。在此基础上构建真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ ／ｈＶＥＧＦ１６５，脂质体介导转染ＣＨＯ－Ｋ１细胞，Ｇ－４１８筛选，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ，Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ分别检测其在细胞内的转录和表达情况，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测表达蛋白的活性。结果：实验组的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ出现特异性条带，而对照组在相应部位未出现条带。实验组的大鼠心肌血管内皮细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率明显高于对照组（Ｐ＜ ０．００１）。结论：本实验所构建的ＶＥＧＦ真核表达质粒能够在真核细胞内获得表达，其表达产物具有血管内皮细胞增殖刺激活性。
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| 关 键 词： | 血管内皮细胞生长因子 哺乳动物 表达 |
Expression of vascular endothelial growth factor in mammalian cell |
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| Gu Hong,Cai Zailong,Chen Shaoping,Zou Lufeng,Song Chunqiao,Mao Jifang. Expression of vascular endothelial growth factor in mammalian cell[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 1999, 20(10): 777-779 |
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| Authors: | Gu Hong Cai Zailong Chen Shaoping Zou Lufeng Song Chunqiao Mao Jifang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | vascular endothelial growth factor mammalian expression |
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