不同年龄大鼠VSMCs培养及衰老相关β-半乳糖苷酶的表达

目的：培养出不同年龄组SD大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs），探讨VSMCs复制衰老过程。方法：取出主动脉，0．2％Ⅱ型胶原酶溶液消化分离细胞，培养，按比例1：3传代。免疫细胞化学鉴定平滑肌细胞β-actin。制备老年组、年轻组的第2．6、11代细胞爬片，用SA-β-gal工作液染色，显微镜下计数蓝染细胞阳性，计算衰老细胞率。结果：免疫细胞化学染色显示细胞纯度在95％以上。细胞衰老β-半乳糖苷酶染色显示随代龄增加，衰老细胞数量增加（P〈0．05）；第6、11代龄，老年组衰老细胞率较年轻组高。结论：1．单纯Ⅱ型胶原酶消化法可以成功培养出不同年龄组大鼠主动脉VSMCs。2．培养的SD大鼠VSMCs表现出复制衰老过程，这可能为探讨细胞衰老及其与年龄相关的疾病机制提供新的视角。