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靶向survivin基因的shRNA质粒表达载体的构建
引用本文:熊英,郭文.靶向survivin基因的shRNA质粒表达载体的构建[J].实用医学杂志,2009,25(4):527-529.
作者姓名:熊英  郭文
作者单位:1. 中国人民解放军第252医院消化科,河北省保定市,071000
2. 南方医科大学南方医院消化病研究所,广州市,510515
基金项目:广东省社会发展领域科技计划 
摘    要:目的:利用pGenesil-1质粒构建靶向survivin基因的2个短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体。方法:设计2对shRNA,GC比在40%~55%之间,进而应用BLAST软件进行同源性剔除,保证所得shRNA序列靶向survivin基因,分别克隆至带有U6启动子的质粒pGenesil-1中,构建质粒表达载体,转化大肠杆菌DH5α菌株扩增,提取质粒,酶切鉴定后测序分析。双酶切重组质粒进行酶切鉴定。结果:成功构建靶向survivin基因的2个shRNA质粒表达载体,经双酶切鉴定及质粒测序结果完全符合设计要求。结论:经鉴定设计的2条shRNA已成功连接于质粒上,可以应用于进一步RNA干扰试验。

关 键 词:RNA干扰    质粒    Survivin    shRNA    
收稿时间:2008-6-17

Construction of shRNA plasmid expression vector of targeted surviving gene
XIONG Ying,GUO wen.Construction of shRNA plasmid expression vector of targeted surviving gene[J].The Journal of Practical Medicine,2009,25(4):527-529.
Authors:XIONG Ying  GUO wen
Abstract:
Keywords:Sunrivin  shRNA
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