| 金钗石斛相关序列扩增多态性反应体系的正交优化研究 |
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| 引用本文： | 赵红燕,冯尚国,沈波,王慧中.金钗石斛相关序列扩增多态性反应体系的正交优化研究[J].中草药,2010,41(8):1353-1358. |
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| 作者姓名： | 赵红燕 冯尚国 沈波 王慧中 |
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| 作者单位： | 杭州师范大学 生物化学与分子生物学杭州市重点实验室，浙江 杭州 310036;杭州师范大学 生物化学与分子生物学杭州市重点实验室，浙江 杭州 310037;杭州师范大学 生物化学与分子生物学杭州市重点实验室，浙江 杭州 310038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，浙江省自然科学基金，浙江省科技计划资助项目，杭州市重点实验室项目，钱江人才计划资助项目 |
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| 摘 要： | 目的建立金钗石斛Dendrobiumnobile相关序列扩增多态性(SRAP)反应体系,为金钗石斛分子生物学研究提供技术支持。方法运用L25(56)正交设计对影响金钗石斛SRAP反应的5个因素:模板DNA、Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物在5个水平上进行优化试验,对PCR结果进行极差分析。结果金钗石斛SRAP反应最佳体系为:25μL PCR体系中含有20 ng模板DNA,2.0 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,1 UTaq酶,0.6μmol/L引物。各因素对SRAP反应的影响依次为:Taq酶Mg2+dNTPs模板DNA引物。结论所建立的金钗石斛SRAP反应体系具有标记位点清晰、多态性丰富、稳定性好等特点,可用于金钗石斛分子生物学的研究。
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| 关 键 词： | 金钗石斛 SRAP 优化 正交设计 |
| 收稿时间： | 2009/11/5 0:00:00 |
Optimization of sequence related amplified polymorphism system in Dendrobium nobile based on orthogonal design |
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| ZHAO Hong-yan,FENG Shang-guo,SHEN Bo and WANG Hui-zhong.Optimization of sequence related amplified polymorphism system in Dendrobium nobile based on orthogonal design[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2010,41(8):1353-1358. |
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| Authors: | ZHAO Hong-yan FENG Shang-guo SHEN Bo and WANG Hui-zhong |
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| Institution: | Key Laboratory of Hangzhou City for Biochemistry and Molecular Biology, Hangzhou Normal University, Hangzhou 310036, China;Key Laboratory of Hangzhou City for Biochemistry and Molecular Biology, Hangzhou Normal University, Hangzhou 310036, China;Key Laboratory of Hangzhou City for Biochemistry and Molecular Biology, Hangzhou Normal University, Hangzhou 310036, China;Key Laboratory of Hangzhou City for Biochemistry and Molecular Biology, Hangzhou Normal University, Hangzhou 310036, China |
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| Abstract: | establish the optimal sequence related amplified polym or phism ( SRAP) reaction system for molecular biology research in Dendrobi umnobile. |
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| Keywords: | Dendrobium nobileLindl sequence-related amplified polymorphism (SRAP) optimization orthogonal design |
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