DEPDC1B结合p65在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及机制研究

目的 研究DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)在肝癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长中的作用及相关机制。方法 分别将过表达DEPDC1B的质粒（oe-flagDEPDC1B）与对照质粒（oe-NC）转染至H22肝癌细胞系中，采用蛋白质印迹法检测flag和DEPDC1B蛋白表达水平，采用CCK-8法检测细胞增殖能力。通过flag抗体富集flag-DEPDC1B结合蛋白，通过质谱进行鉴定，并对免疫共沉淀物进行关键蛋白验证。在oe-flag-DEPDC1B转染细胞中加入p65抑制剂Helenalin，采用实时荧光定量PCR法检测IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平，采用CCK-8法检测细胞增殖能力。分别将oe-flag-DEPDC1B和oe-NC转染细胞注射至C57/B6小鼠皮下，注射后2周开始监测小鼠肿瘤体积，注射后5周处死小鼠。分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白质印迹法和ELISA法检测肿瘤组织中DEPDC1B、p65、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果 与oe-NC组细胞比较，oe-flag-DEPDC1B组细胞中DEPDC1B蛋白表达水平显著升高，细胞增殖能力显...