| 小鼠血管紧张素转化酶2基因表达型载体的构建及体外表达 |
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| 引用本文： | 卢卓强,晋学庆. 小鼠血管紧张素转化酶2基因表达型载体的构建及体外表达[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2010, 14(46). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.46.012 |
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| 作者姓名： | 卢卓强 晋学庆 |
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| 作者单位： | 福建医科大学附属第一医院心血管内科,福建省福州市,350000 |
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| 基金项目： | 国家人事部留学回国人员科技活动择优资助项目 |
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| 摘 要： | 背景:通过转基因疗法使血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme,ACE2)过度表达来治疗心血管病是当前ACE2研究的趋势,而构建含ACE2基因的载体则能为该研究方法提供工具.目的:构建含小鼠血管紧张素转化酶2基因的真核表达载体,并验证其蛋白的表达.方法:采用RT-PCR的方法从C57小鼠肾脏扩增出ACE2基因全长cDNA序列,并通过酶切连接和转化等分子生物学方法将其定向克隆至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,构建小鼠ACE2基因的真核表达载体pm-ACE2,并通过酶切及测序鉴定.通过脂质体转染法将所构建的pm-ACE2转染COS7细胞,并利用Western blot检测COS7细胞中ACE2蛋白的表达.结果与结论:通过测序并与GeneBank上的小鼠血管紧张素转化酶2序列(NM_27286.3)比对,证实实验成功克隆小鼠ACE2基因全长cDNA至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,测序结果提示存在3处同义突变;所构建的pm-ACE2在真核细胞中具有ACE2蛋白的表达.结果提示实验成功构建了小鼠ACE2基因真核表达载体,此载体具有表达ACE2蛋白的功能.
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| 关 键 词： | 血管紧张素转化酶2基因 载体 COS7细胞 真核细胞 基因表达 组织构建 |
Construction of recombinant eukaryotic expression plasmid containing mouse angiotensin-converting enzyme 2 gene and its in vitro expression |
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| Lu Zhuo-qiang,Jin Xue-qing. Construction of recombinant eukaryotic expression plasmid containing mouse angiotensin-converting enzyme 2 gene and its in vitro expression[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2010, 14(46). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.46.012 |
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| Authors: | Lu Zhuo-qiang Jin Xue-qing |
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