人端粒酶催化亚单位mRNA的实时荧光RT-PCR定量检测 |
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引用本文: | 郭颖,刘军,薛采芳,吴静,宋天保. 人端粒酶催化亚单位mRNA的实时荧光RT-PCR定量检测[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2004, 20(5): 618-620 |
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作者姓名: | 郭颖 刘军 薛采芳 吴静 宋天保 |
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作者单位: | 1. 西安交通大学第二医院妇产科,陕西,西安,710001 2. 第四军医大学病原生物学教研室,陕西,西安,710032 3. 西安交通大学医学院组胚学教研室,陕西,西安,710061 |
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基金项目: | 陕西省自然科学基金资助项目 (No .2 0 0 3C2 1 7) |
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摘 要: | 目的 :建立可定量测定人端粒酶催化亚单位 (hTERT)mRNA的实时荧光反转录PCR方法。方法 :用Trizol 试剂从HepG2细胞中分离总RNA ,然后反转录为cDNA。利用一对基因特异引物和一条TaqManMGB探针 ,以实时荧光PCR定量hTERT的cDNA。同时定量测定人 β 肌动蛋白 (hBA)的mRNA作为内对照。用梯度稀释的克隆的人 β 肌动蛋白基因制作标准曲线。结果 :标准曲线的相关系数为 1.0 0。实时荧光反转录PCR方法的平均变异系数为 7.1%。HepG2细胞hTERTmRNA与hBAmRNA的比值为 (1.3± 0 .3)× 10 -4。结论 :建立了可定量测定人端粒酶催化亚单位 (hTERT)mRNA的实时荧光反转录PCR方法。本方法的建立将有助于研究端粒酶的生物功能
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关 键 词: | 实时PCR 人端粒酶催化亚单位 端粒酶 |
文章编号: | 1007-8738(2004)05-0618-03 |
修稿时间: | 2004-06-15 |
Quantitafion of human telomerase reverse transcriptase mRNA with real-time fluorescent RT-PCR |
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Abstract: | |
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Keywords: | real-time PCR hTERT telomerase |
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