GATA-3基因表达质粒的构建及在大鼠脑细胞中的表达 |
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引用本文: | 俞琼,杨培增,黄祥坤,李兵,纪淑兴,张锐. GATA-3基因表达质粒的构建及在大鼠脑细胞中的表达[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2004, 25(3): 231-233 |
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作者姓名: | 俞琼 杨培增 黄祥坤 李兵 纪淑兴 张锐 |
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作者单位: | 中山大学中山眼科中心免疫学实验室,广东,广州,510060 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家自然科学基金,广东省自然科学基金,广东省教育厅千百十工程优秀人才培养基金 |
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摘 要: | [目的]构建GATA-3基因正义、反义重组质粒,为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础.[方法]采用PCR技术扩增GATA-3基因,通过酶切、连接、转化等分子生物学技术,将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3,构建质粒后转染大肠杆菌,并在大肠杆菌中扩增.同时用脂质体法感染大鼠脑细胞.[结果]从大鼠脑细胞中成功地克隆出全长1335 bp的GATA-3基因,并经序列分析筛选证实GATA-3基因以正向、反向重组转染入载体,且在大肠杆菌中得到扩增,同时用RT-PCR方法检测到反义重组体对大鼠脑细胞表达该基因具有抑制作用.[结论]通过基因克隆方法成功构建了GATA-3基因正义、反义表达质粒,并初步证实反义GATA-3具有抑制细胞正常表达作用,为深入研究GATA-3对T细胞发育分化的影响奠定了基础.
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关 键 词: | 基因,GATA-3 基因表达 |
文章编号: | 1672-3554(2004)03-0231-03 |
修稿时间: | 2003-08-27 |
Construction of GATA-3 Expressing Plasmid and the Expression of GATA-3 in Rat Brain Cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | gene GATA-3 gene expression |
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