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GATA-3基因表达质粒的构建及在大鼠脑细胞中的表达
引用本文:俞琼,杨培增,黄祥坤,李兵,纪淑兴,张锐. GATA-3基因表达质粒的构建及在大鼠脑细胞中的表达[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2004, 25(3): 231-233
作者姓名:俞琼  杨培增  黄祥坤  李兵  纪淑兴  张锐
作者单位:中山大学中山眼科中心免疫学实验室,广东,广州,510060
基金项目:国家自然科学基金,国家自然科学基金,广东省自然科学基金,广东省教育厅千百十工程优秀人才培养基金
摘    要:[目的]构建GATA-3基因正义、反义重组质粒,为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础.[方法]采用PCR技术扩增GATA-3基因,通过酶切、连接、转化等分子生物学技术,将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3,构建质粒后转染大肠杆菌,并在大肠杆菌中扩增.同时用脂质体法感染大鼠脑细胞.[结果]从大鼠脑细胞中成功地克隆出全长1335 bp的GATA-3基因,并经序列分析筛选证实GATA-3基因以正向、反向重组转染入载体,且在大肠杆菌中得到扩增,同时用RT-PCR方法检测到反义重组体对大鼠脑细胞表达该基因具有抑制作用.[结论]通过基因克隆方法成功构建了GATA-3基因正义、反义表达质粒,并初步证实反义GATA-3具有抑制细胞正常表达作用,为深入研究GATA-3对T细胞发育分化的影响奠定了基础.

关 键 词:基因,GATA-3  基因表达
文章编号:1672-3554(2004)03-0231-03
修稿时间:2003-08-27

Construction of GATA-3 Expressing Plasmid and the Expression of GATA-3 in Rat Brain Cells
Abstract:
Keywords:gene   GATA-3  gene expression
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