| 人MeCP2基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 郭玲玲,段凤英,邱小华.人MeCP2基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定[J].实用肿瘤杂志,2008,23(3):229-233. |
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| 作者姓名： | 郭玲玲 段凤英 邱小华 |
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| 作者单位： | 南昌大学第二附属医院呼吸内科,江西,南昌,330006 |
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| 基金项目： | 江西省科学技术厅社会发展攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建针对人甲基化结合蛋白MeCP2的shRNA真核表达质粒,稳定转染肺腺癌细胞A-549观察其对MeCP2表达的影响.方法 根据MeCP2的mRNA序列,利用Ambion网上设计软件设计两条针对该基因不同靶点的shRNA干扰序列,克隆到线性化的质粒载体上,PCR、测序鉴定插入成功,且插入方向正确.转染A-549细胞,观察其在mRNA和蛋白水平对MeCP2的影响.结果 成功构建两个MeCP2的shRNA真核表达质粒,并稳定转染到肺癌细胞A-549中,两个真核表达质粒在mRNA水平和蛋白水平对MeCP2有明显的抑制作用.结论 人MeCP2的shRNA真核表达质粒成功构建及鉴定为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 肺肿瘤/遗传学 基因表达 质粒 克隆 分子 肿瘤细胞 培养的 基因 shRNA 真核表达质粒 human targeting sections vectors eukaryotic expression identification 功能 蛋白水平 研究 抑制作用 平和 癌细胞 结果 转染 方向 测序鉴定 质粒载体 |
| 文章编号： | 1001-1692(2008)03-0229-05 |
| 修稿时间： | 2007年11月5日 |
Construction and identification of eukaryotic expression vectors expressing shRNA sections targeting human MeCP2 |
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| GUO Ling-ling,DUAN Feng-ying,QIU Xiao-hua.Construction and identification of eukaryotic expression vectors expressing shRNA sections targeting human MeCP2[J].Journal of Practical Oncology,2008,23(3):229-233. |
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| Authors: | GUO Ling-ling DUAN Feng-ying QIU Xiao-hua |
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