| 基于基因转染法的胸苷磷酸化酶高表达结肠癌细胞株的建立 |
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| 引用本文： | 王绮雯,刘剑,叶钿均,张继民. 基于基因转染法的胸苷磷酸化酶高表达结肠癌细胞株的建立[J]. 广东医学, 2015, 0(1) |
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| 作者姓名： | 王绮雯 刘剑 叶钿均 张继民 |
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| 作者单位： | 1. 广州医科大学附属第二医院外科实验室 广州 510260
2. 广州医科大学附属第二医院胃肠外科 广州 510260 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：构建表达高度胸苷磷酸化酶（TP）活性并可以稳定传代的结肠癌细胞株。方法合成包含TP cDNA 全长的真核细胞表达载体，用慢病毒包装后转染人结肠癌细胞株 SW480、LOVO、HT29和 LS174T，流式细胞仪检测转染效率，实时荧光定量 RT －PCR 方法检测 TP 的 mRNA 表达，蛋白印迹法（Western blot）检测 TP 蛋白表达。结果转染 TP cDNA 后，SW480、LOVO、HT29与 LS174T 在传代5代后转染效率仍稳定在95％左右。与未转染 TP 基因的亲代细胞相比，SW480－TP、LOVO －TP、HT29－TP 与 LS174T －TP 的 TP mRNA 的表达分别提高了（694．56±171．53）、（282．46±86．85）、（8．45±0．15）和（2615．02±253．97）倍，差异有统计学意义（P ＜0．05）；并且 TP 蛋白的表达水平也显著提高。结论慢病毒载体能够高效地将 TP cDNA 转染至人结肠癌细胞 SW480、LO－VO、HT29和 LS174T 中，所得克隆能够稳定传代，并能显著提高4株结肠癌细胞 TP 的 mRNA 和蛋白表达水平。
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| 关 键 词： | 胸苷磷酸化酶 基因转染 慢病毒 结肠癌细胞株 |
Enhancement of thymidine phosphorylase expression in the human colorectal cancer cell lines by transfected TP cDNA with lentiviral vector |
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| WANG Qi-Wen,LIU Jian,YE Dian-Jun,ZHANG Ji-min. Enhancement of thymidine phosphorylase expression in the human colorectal cancer cell lines by transfected TP cDNA with lentiviral vector[J]. Guangdong Medical Journal, 2015, 0(1) |
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| Authors: | WANG Qi-Wen LIU Jian YE Dian-Jun ZHANG Ji-min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | thymidine phosphorylase gene transfection lentiviral vector SW480 LOVO HT29 LS174T |
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