siRNA干扰下调Moesin表达对U251细胞生长和侵袭能力的影响

目的：研究RNA干扰（RNAi）对人脑胶质细胞瘤（U251）中Moesin蛋白基因表达的抑制作用及其对U251细胞生长、侵袭的影响.方法：以人脑胶质细胞瘤U251细胞系为研究对象,针对Moesin编码基因设计小干扰RNA（siRNA）片段,转染入细胞,通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）筛选沉默效率最高的siRNA片段,并用WesternBlot技术检测定量转染后U251细胞Moesin蛋白的表达水平.转染后以MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞的凋亡水平;Transwell法检测侵袭能力的变化,并以扫描电镜观察转染后的细胞形态变化.结果：RT-PCR,WesternBlot筛选出的MOESIN-139片段沉默效果最好,siRNA转染后U251细胞生长速度减慢,在转染48h时,siRNA组U251细胞生长速度明显低于空白对照组和阴性对照组（P〈0.01）,平均凋亡率siRNA组为（17.30±2.01）%,远高于空白对照组（1.95±0.33）%和阴性对照组（2.02±0.28）%（P〈0.01）.siRNA转染后的U251细胞穿过聚碳酯膜的细胞数量明显减少,由空白对照组26.47±4.07,阴性对照组24.27±3.63下降至siRNA组11.53±2.61（P〈0.01）.细胞形态发生改变,细胞表面伪足数由空白对照组14.20±2.58,阴性对照组15.80±1.30下降至siRNA组6.60±1.82（P〈0.01）.结论：siRNA可下调Moesin的表达,并能有效抑制U251细胞的生长,减低其侵袭性.Moesin有可能成为治疗人脑胶质瘤的靶点分子.

siRNA interfere with growth and invasion of U251 cell by reducing expression of Moesin