| HMGB1启动子荧光素酶报告基因的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 丁宁,肖慧,高巨,许立新,佘守章.HMGB1启动子荧光素酶报告基因的构建及鉴定[J].第四军医大学学报,2009(22):2580-2582. |
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| 作者姓名： | 丁宁 肖慧 高巨 许立新 佘守章 |
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| 作者单位： | 广州市第一人民医院麻醉科及麻醉学实验室;广州市第一人民医院门诊部;广州中医药大学第二附属医院麻醉科; |
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| 基金项目： | 广州市医药卫生科技项目(2008-yB-012); 重点项目(2008-zDi-14); 广东省科技计划项目(2007B31509007) |
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| 摘 要： | 目的：构建高迁移率族蛋白B1（HMGB1）启动子驱动的荧光素酶报告基因的真核表达载体pGL3-HMGB1P,转染肺泡上皮细胞（A549）后检测报告基因在机械牵张刺激中的转录活性.方法：以A549细胞基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增HMGB1启动子片段,测序正确后克隆入荧光素酶报告基因表达载体pGL3,将重组质粒pGL3-HMGB1P导入A549细胞,检测不同强度机械牵张（分别为5%和20%）刺激下荧光素酶的活性变化.结果：PCR和测序结果表明扩增的HMGB1启动子序列正确,酶切检测证实重组真核表达载体pGL3-HMGB1P构建成功.在5%牵张应变作用下,转染pGL3-HMGB1P的A549细胞荧光素酶活性是转染空载体pGL3-Basic的2.9倍（P〈0.05）;而在20%牵张应变作用下,转染pGL3-HMGB1P的A549细胞荧光素酶活性是转染空载体pGL3-Basic的6.2倍（P〈0.01）.结论：利用荧光素酶报告基因系统证实机械牵张可诱导HMGB1转录表达增加,为深入研究HMGB1转录表达的调控机制提供了基础.
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| 关 键 词： | 机械牵张 高迁移率族蛋白1 基因 报告 |
Construction and identification of luciferase reporter gene vector containing HMGB1 promoter |
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| DING Ning,XIAO Hui,GAO Ju,XU Li-Xin,SHE Shou-Zhang.Construction and identification of luciferase reporter gene vector containing HMGB1 promoter[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2009(22):2580-2582. |
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| Authors: | DING Ning XIAO Hui GAO Ju XU Li-Xin SHE Shou-Zhang |
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| Institution: | DING Ning1,XIAO Hui2,GAO Ju3,XU Li-Xin1,SHE Shou-Zhang1 1Department of Anesthesiology,2Department of Out-patient,Guangzhou First People's Hospital,Guangzhou 510180,China,3Department of Anesthesiology,Second Affiliated Hospital,Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine,Guangzhou 510120 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mechanical stretch high mobility group box 1 protein gene reporter |
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